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脾細胞 リンパ球 ペプチド刺激 トピック削除
No.3867-TOPIC - 2015/02/18 (水) 03:56:46 - MA
ウイルス感染(経鼻感染)させたのちの、マウス脾臓を用いて、ウイルス由来蛋白に対する抗原特異的リンパ球の増殖・反応をvitroで見ています。脾臓を、メッシュでつぶしたのち、24well-plateに5x10-6乗個に撒き、ペプチドを1ug/mLから10pg/mLまで、10倍ずつ濃度にふり、添加して、6日後に、ペプチド特異的CD8細胞の増殖を見ていますが、強く増殖する時と、あまり増殖しない時の、ばらつきが大きく、苦慮しています。
 
一定して、強く増殖させるための、なにかコツなどはありますでしょうか。同じような体験をされた方、もしくは、問題なくできている方の、ご意見があれば、伺いたいです。
 
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(無題) 削除/引用
No.3867-2 - 2015/02/18 (水) 11:52:05 - TK-1
どのウイルス(インフルエンザ?)を感染させてから何日後にどれだけ待つのか、とか細かいことが書いてないので具体的にどうしているのかは分かりませんが、それなりに可能性があるのは感染がうまく行っているかではないですか?その辺りはどうやって検討しているんですか?

脾細胞 リンパ球 ペプチド刺激 削除/引用
No.3867-1 - 2015/02/18 (水) 03:56:46 - MA
ウイルス感染(経鼻感染)させたのちの、マウス脾臓を用いて、ウイルス由来蛋白に対する抗原特異的リンパ球の増殖・反応をvitroで見ています。脾臓を、メッシュでつぶしたのち、24well-plateに5x10-6乗個に撒き、ペプチドを1ug/mLから10pg/mLまで、10倍ずつ濃度にふり、添加して、6日後に、ペプチド特異的CD8細胞の増殖を見ていますが、強く増殖する時と、あまり増殖しない時の、ばらつきが大きく、苦慮しています。
 
一定して、強く増殖させるための、なにかコツなどはありますでしょうか。同じような体験をされた方、もしくは、問題なくできている方の、ご意見があれば、伺いたいです。

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