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(無題) 削除/引用 No.3767-9 - 2022/09/05 (月) 01:58:50 - たこ 当然条件次第という面はありますが、当方は現状でLipo3000を最優先で使用することはありません。 293Tでの経験ですが 組換レンチの作製で使用したことがありますが、Lipo3000ではなぜか細胞が壊滅的に死んでしまいました。 plasmid無しでは死ななかったので使用したplasmidの問題かもしれませんが、同条件でlipo2000を使用しても全く死なず、まずまずのtiterが得られました。 tech supportの言い分としては、導入効率が高すぎて死んでいるようなことを言っていました。 いや、ホンマかいなそれ・・・ RNAiMAXでうまくいかなかった細胞にLipo3000でうまくいくこともありましたので、使う価値なしとは言いませんが・・・ 試供品で済む条件検討だけだったのでそれから新規で購入はしておりません。

LIPOFECTAMINE LTXトランスフェクションタイムスケジュールについて 削除/引用 No.3767-8 - 2022/08/17 (水) 12:43:16 - 本田徹郎 LIPOFECTAMINE LTXを用いて、プラスミドDNAを不死化細胞に導入して過剰発現させ、WBで確認を行う予定です。LIPOFECTAMINE LTXを用いたトランスフェクションのタイムスケジュールについて教えていただきませんでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.3767-7 - 2015/01/26 (月) 21:46:52 - おお FugeneHDもよさげですね。

(無題) 削除/引用 No.3767-6 - 2015/01/26 (月) 14:42:03 - MP Lentivirusのtiterが上がるかどうか試供品を試してみましたが、 FugeneHDの方がtiterは高かったです。LTXではどうなんだろうというのは興味のあるところです。

(無題) 削除/引用 No.3767-5 - 2015/01/26 (月) 14:14:39 - おお みなさんありがとうございます。効率という面ではそれほどメリットはなさそうですね。

(無題) 削除/引用 No.3767-4 - 2015/01/26 (月) 13:12:16 - リポフェク 3000とLTXを比較したことがあります。 当時3000が非常にプッシュされており、LTXとどちらが良いのだろうと思い、Luc assayで検討しましたが、約10倍ほどLTXの方がFireflyの活性が高く出ました。 正直、LTXと3000では試薬の推奨Volumeが異なっていたと記憶しておりますが、それを加味してもLTXの方が断然良い印象です。 あと、ライフテクノロジーズ自体がLTXと3000では比較実験をほとんどしていなかったと思います。2000と3000の比較データばかりでしたのでそりゃ当然3000の方が良いっていうデータ出るだろと当時から思っていました。 また、操作が簡便になったとありますが、実は3000だけではなくLTXでも30minも待たずに、確か5min待つだけでトランスフェクションして良いとプロトコールが変更されていたと思います。IP-WB, Luc assayのサンプルで私自身全く問題ありませんでした。 ですので私の見解としてはLTXの方が導入効率も良いし、細胞に対するダメージも3000の方が良いといったことは無かったです。 ただ当たり前のことですが、使用する細胞によって毒性が強く出たり、プラスミドの入りが悪かったりする可能性があるので検討するしかないのかもしれません。 これまでに293, 293T, cos7, HeLaなどの代表的な細胞に使用していますがLTXで問題はありません。 他のメーカーのGenejuiceやPromegaのFuGeneなどとも比較しましたがトランスフェクションするならLTXが圧倒的に導入効率が良いという感想です。 LTX ≧ FuGene HD(Promega) > 3000 > GeneJuice 参考になれば幸いです。 P.S. トランスフェクション前日にpenicillin/Streptomycin無し、血清ありの培地で細胞を準備し、翌日LTXでトランスフェクション後4-6hで培地交換(+ P/S、+ 血清)しています。

(無題) 削除/引用 No.3767-3 - 2015/01/22 (木) 08:49:58 - TS まずLTXやLF2000に比べると、作業時間が短くなって楽ですね。 わたしは、消化管の上皮細胞にプラスミドを導入するのにLTXを使っていましたが、、 LF3Kでの導入効率はLTXと大体同じか、くらいでしたので、作業時間を考えて切り替えました。 RNAiについては、RNAi maxの方がはるかに良かったです。 今でも試供品もらえると思いますよ。

(無題) 削除/引用 No.3767-2 - 2015/01/22 (木) 07:45:03 - み 1年前、試供品が入手可能でした。 海馬神経細胞初代培養には殆ど入らなかった。 LF2000やLTXは入るけど。 他の細胞には試していない。

LIPOFECTAMINE 3000 削除/引用 No.3767-1 - 2015/01/22 (木) 06:26:58 - おお LIPOFECTAMINE 3000を試された方、感触、ほかのLIPOFECTAMINE シリーズとの比較、気がついたことなどあればシェアしていただけませんでしょうか

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