Bio Technical フォーラム

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細胞の選択_ルシフェラーゼアッセイ(PPAR) トピック削除
No.373-TOPIC - 2012/04/05 (木) 20:56:14 - とも
現在、ある分子がPPARγの活性に与える影響をルシフェラーゼアッセイで調べたいと考えています。

その分子は、神経系の細胞で発現しているので、できれば神経系の細胞株を用いてアッセイを行いたいと思っているのですが、どういう基準で細胞株を選択すべきか悩んでいます。


内在性のPPAR(α・β・γ)の影響や、調べたい分子と同一ファミリーの分子の存在...など、細胞を選択する際に考慮すべきことは多々ありますが...

通常、どのように細胞株の選択を行っていらっしゃるのでしょう?

研究室にある細胞については上記の発現について調べてみましたが、適当な細胞はなく(すべてのPPARが発現していたり、同一ファミリー分子が数種高発現していたり・・・)、新たに購入して片っ端から内在性の発現レベルを調べていくようなお金も時間もありません。。

このような質問をして本当にお恥ずかしいのですが、
もし何かアドバイス等ございましたら、お教えいただけませんでしょうか?
よろしくお願いいたします。
 
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(無題) 削除/引用
No.373-2 - 2012/04/10 (火) 11:58:25 - 脂肪
内因性の活性にこだわらないのであれば、今ある細胞株でPPARγとその分子を強制発現してみてはいかがですか?

細胞の選択_ルシフェラーゼアッセイ(PPAR) 削除/引用
No.373-1 - 2012/04/05 (木) 20:56:14 - とも
現在、ある分子がPPARγの活性に与える影響をルシフェラーゼアッセイで調べたいと考えています。

その分子は、神経系の細胞で発現しているので、できれば神経系の細胞株を用いてアッセイを行いたいと思っているのですが、どういう基準で細胞株を選択すべきか悩んでいます。


内在性のPPAR(α・β・γ)の影響や、調べたい分子と同一ファミリーの分子の存在...など、細胞を選択する際に考慮すべきことは多々ありますが...

通常、どのように細胞株の選択を行っていらっしゃるのでしょう?

研究室にある細胞については上記の発現について調べてみましたが、適当な細胞はなく(すべてのPPARが発現していたり、同一ファミリー分子が数種高発現していたり・・・)、新たに購入して片っ端から内在性の発現レベルを調べていくようなお金も時間もありません。。

このような質問をして本当にお恥ずかしいのですが、
もし何かアドバイス等ございましたら、お教えいただけませんでしょうか?
よろしくお願いいたします。

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