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(無題) 削除/引用 No.3701-5 - 2015/01/07 (水) 23:24:49 - 培養乙 血清中にはDNaseがあるので　FBS入りの培地ならDNase含んでるとおもう。血中にDNAがふらふら出てくると変な抗体が出来たりしてよろしくないので、そのためにあるらしい。FBS中のDNaseをあてにするならば血清の加熱処理はしないほうがいい。最近は、特別な場合を除いては加熱処理する必要ないって流れらしいし、たぶんしなくても問題ないとおもうけど。 DNaseの阻害物質はG-actinかな。

(無題) 削除/引用 No.3701-4 - 2015/01/06 (火) 19:43:05 - 独り言 DNAseにこだわらなくていいのであれば、ガンマ線とか放射線でDNAをズタズタにできるのかと思います。一般的にはさまざまなものの滅菌によく使われているはずです。そうすればDNAseとかを除く手間がいらない。

(無題) 削除/引用 No.3701-3 - 2015/01/06 (火) 18:43:20 - ~ 培養上清中の何を残したまま、細胞Bを処理することが目的なのでしょうか？ 何も気にしなくていいのであれば、DNaseならば熱処理で失活させられますが、 それで目的の物質も失活や分解するようであれば熱処理できませんよね。 想定できる物質が具体的であれば、それを精製、定量等する手もあるでしょう。

(無題) 削除/引用 No.3701-2 - 2015/01/06 (火) 10:03:51 - Pluton http://www.sinobiological.com/DNASE1-Deoxyribonuclease-I-DNL1-Protein-g-12324.html こういうので適当にdigestしてからアフィニティカラムとかビーズで除けばいいのでは？ 分解後のオリゴヌクレオチドはそのままでいいんでしょう？

培養上清中のDNAを分解したい 削除/引用 No.3701-1 - 2015/01/06 (火) 08:39:02 - かん 細胞Aの培養上清を回収し、 上清中のDNAをDNaseで分解処理して 細胞Bにこの上清をかけて反応を見たいと思っております。 １．このような実験で最適なDNase製品、DNase濃度(unit) ２．細胞Bにかける前にDNaseを不活化する最適な方法 を思案しております。 同様な実験を経験され、何か智恵をお持ちの方がおられれば アドバイスいただけないでしょうか。 お願い致します。

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