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細胞凍結保存について トピック削除
No.3559-TOPIC - 2014/11/18 (火) 11:19:53 - たま
細胞培養初心者です。よろしくお願いします。

はじめて細胞を凍結保存するのですが問題が2点

線維芽細胞を凍結させようとしています

@研究室のディープフリーザーの温度がマイナス70度
(本で調べる限りどれもマイナス80度と記載されています)
 マイナス70度でも大丈夫でしょうか?

Aディープフリーザー内に入れて凍結する際、細胞を入れたバイアルを素のままでディープフリーザー内に入れていいんでしょうか?
それともバイアルをさらに専用の小箱?にいれてディープフリーザー内に入れたほうがよいのでしょうか?
一度しか細胞凍結しないため専用の小箱を買う費用がもったいないと思いまして・・

くだらない質問ですがよろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3559-3 - 2014/11/18 (火) 18:00:14 - mbb
セルバンカーは特別な容器を使わなくても
-80度保存ができたとおもいます。
うちもディープフリーザは-70℃ですが、
とりあえず保存して解凍後培養が出来てい
ます。

(無題) 削除/引用
No.3559-2 - 2014/11/18 (火) 12:41:47 - tete
cellbank.nibio.go.jp/legacy/information/hsrrb/default.htm

> ゆっくり凍結して( ー1℃/分)、素早く溶かし(37℃温浴)、
> 凍結保護剤を速やかに除去することが成功の条件です。殊に凍結の
> 前後、DMSOを添加した細胞浮遊液は常に低温度で操作すること。
> 凍結用のプログラムフリーザーを用いれば( ー1℃/分)の条件は
> 満たせますが、発泡スチロールの箱などの断熱材(新聞紙で多層に
> 包装しても効果がある)を利用してフリーザーに入れるなどの工夫
> をすれば、ゆっくり凍結することが可能です。最終低温度に落ち着
> くまでを、なるべくスムーズに下げてゆくことも、高い生存率を得
> る条件です。下げてゆく過程で、ー 50℃より高い温度で長時間置く
> と(例えば冷蔵庫、ー 30℃のフリーザー)極端に生存率が低下しま
> す。凍結中に細胞が死ぬと、集団内での選別が起こり、再培養した
> 細胞系が凍結前と性質を異にすることさえあります。
>
> 細胞の凍結保存では -65℃ 以下で保存することが必須であるとさ
> れていますが、低いほど長期間の保存に耐えます。例えば液体窒素
> なら-196℃での保存となり、10年以上生存することが確認されてい
> ます.しかし、-80℃では良くても1年が限界です。

細胞凍結保存について 削除/引用
No.3559-1 - 2014/11/18 (火) 11:19:53 - たま
細胞培養初心者です。よろしくお願いします。

はじめて細胞を凍結保存するのですが問題が2点

線維芽細胞を凍結させようとしています

@研究室のディープフリーザーの温度がマイナス70度
(本で調べる限りどれもマイナス80度と記載されています)
 マイナス70度でも大丈夫でしょうか?

Aディープフリーザー内に入れて凍結する際、細胞を入れたバイアルを素のままでディープフリーザー内に入れていいんでしょうか?
それともバイアルをさらに専用の小箱?にいれてディープフリーザー内に入れたほうがよいのでしょうか?
一度しか細胞凍結しないため専用の小箱を買う費用がもったいないと思いまして・・

くだらない質問ですがよろしくお願いします。

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