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(無題) 削除/引用 No.3552-5 - 2014/11/16 (日) 17:13:08 - 名無し そりゃ実験自体は出来るとは思います、でも何でまたでわざわざ結果の解釈を難しくするするような事をあえてするのかが私は非常にアレです。通常のIPで余計なバンドが１本出てきても、(いいい意味でもそうでない意味でも)、いろいろややこしくなるのに。

(無題) 削除/引用 No.3552-4 - 2014/11/16 (日) 02:10:21 - おお 目的がわからないので、何ともいえません。 もし蛋白が抗体がアクセスできない複合体をとることがあるなら、IPフラクションは、lysateの中の蛋白量を反映しないでしょう。 IP後のWBのほうは個別にやるんですか?

(無題) 削除/引用 No.3552-3 - 2014/11/15 (土) 22:12:13 - 774R あ、単に感度を上げるために濃縮するだけの目的なら問題ないかもしれませんね。

(無題) 削除/引用 No.3552-2 - 2014/11/15 (土) 22:06:30 - 774R 何かしらの結果は出るでしょうし、結果は結果として信頼性？はあるでしょうが、解釈をする段階で何が何だかさっぱり分からないことになりそうです。 個別の抗体でIPじゃなんで駄目なんですか？

免沈(IP)について 削除/引用 No.3552-1 - 2014/11/15 (土) 19:22:45 - こここｋ 現在、免疫沈降を行っていますが初心者ですので、ご指導のほどよろしくお願いします。 たとえば6 cmシャーレで培養中の細胞をRIPA bufferで溶解し、IPしたい複数の目的タンパクの抗体を同時にまとめて添加し、proteinGビーズで沈降させ、WBで各々の目的タンパクの一次抗体で検出するといった、目的タンパクをまとめて沈降させる方法は可能でしょうか。また、できた場合に、データの信頼性はいかがでしょうか。 愚問かもしれませんが、アドバイスのほどよろしくお願いします。

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