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多核細胞(肝細胞)の細胞周期解析について トピック削除
No.3536-TOPIC - 2014/11/12 (水) 00:10:58 - あんときのアン
肝細胞(Huh7細胞)の細胞周期解析についての質問です。現在、DNAをヘキストで、RNAをピロニンYにより染色し、FACSによる解析によりG0期の細胞の割合を調べています。肝細胞はもともと多核の細胞であることから、上記の方法での周期解析は、根本的に方法として間違っているのでしょうか?上記の方法を使った肝細胞の細胞周期解析を行っている論文などもあり、悩んでおります。初歩的な質問で誠に恐縮ですが、ご教示頂けますと幸いです。
 
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No.3536-3 - 2014/11/12 (水) 09:29:55 - AP
肝細胞が二核であることが多いというのは、分化した肝組織中のことで、分裂増殖中の肝細胞はそうじゃないはずですが。今ではもっと詳しく解明されているのかもしれませんが、学生の頃に読んだ組織学の教科書によると、最後の分裂が細胞質分裂を伴わない無糸分裂であるからだと考えられているということでした。肝臓の損傷などで再生が起こるときは普通の有糸分裂になるということです。

(無題) 削除/引用
No.3536-2 - 2014/11/12 (水) 00:28:04 - おお
pubmedなどでHuh7 cell cycleで検索してみてください。googleでもいいかもしれません。ちらっと見た感じ、G1/S/G2のフローサイトによる解析はやられているように見えます。

確かに肝組織では多核になったものがよく見られるとききますが、培養した細胞ではそう言うのをききません。まずは顕微鏡でよく確かめてみてはどうでしょうか。たまに調子がわるくなって多核になる細胞はいろいろな細胞株でみられますが、通常の培養条件下では数%内(1%とか2%とか)にとどまると思います。

RNAの染色によりG0が割り出せるんでしょうか。この辺は明るくないので後学のために教えていただければ嬉しいです。

多核細胞(肝細胞)の細胞周期解析について 削除/引用
No.3536-1 - 2014/11/12 (水) 00:10:58 - あんときのアン
肝細胞(Huh7細胞)の細胞周期解析についての質問です。現在、DNAをヘキストで、RNAをピロニンYにより染色し、FACSによる解析によりG0期の細胞の割合を調べています。肝細胞はもともと多核の細胞であることから、上記の方法での周期解析は、根本的に方法として間違っているのでしょうか?上記の方法を使った肝細胞の細胞周期解析を行っている論文などもあり、悩んでおります。初歩的な質問で誠に恐縮ですが、ご教示頂けますと幸いです。

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