Bio Technical フォーラム

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免疫2重染色でシグナルが消える トピック削除
No.348-TOPIC - 2012/03/30 (金) 23:13:23 - 初心者
腸組織の蛍光2重染色をしています。

それぞれの抗体の単線色だとシグナルが出るのですが、同じ抗体を使って2重染色をすると、両方の抗体のシグナルが消えてしまいます。

抗体はどちらも抗体に直接蛍光がついているもので、 アイソタイプはどちらもrat IgG2a Kです。

抗体のコンビネーションの問題でしょうか?

初歩的な質問で申し訳ありませんが、お分かりの方、よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.348-3 - 2012/03/31 (土) 13:41:43 - Harmonia
2重染色−単線色検出?
1重染色−単線色検出?

抗体の干渉 削除/引用
No.348-2 - 2012/03/31 (土) 04:18:39 - 通りすがり
 一般に、2種類の抗体を混ぜてインキュベートするとそれぞれの抗体が干渉しあい、シグナルが弱くなります。今回はその極端な例なのかもしれません。まずは、2種の抗体の反応を別々に行うのはどうでしょうか。

免疫2重染色でシグナルが消える 削除/引用
No.348-1 - 2012/03/30 (金) 23:13:23 - 初心者
腸組織の蛍光2重染色をしています。

それぞれの抗体の単線色だとシグナルが出るのですが、同じ抗体を使って2重染色をすると、両方の抗体のシグナルが消えてしまいます。

抗体はどちらも抗体に直接蛍光がついているもので、 アイソタイプはどちらもrat IgG2a Kです。

抗体のコンビネーションの問題でしょうか?

初歩的な質問で申し訳ありませんが、お分かりの方、よろしくお願いします。

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