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caco-2の培養方法について トピック削除
No.3436-TOPIC - 2014/10/06 (月) 11:54:20 - TJ
いつも勉強させていただいてます。

現在caco-2細胞を使用して、膜透過の研究をしています。
タイトジャンクションの形成には「21日間」の培養かTER値の上昇(大体1000以上?)がスタンダードと私は解釈しています。

現在caco2の培養をしていますが、培地の栄養消費が早い割に、非常に弱い細胞である印象を受けています。培養中、光学顕微鏡で細胞を観察すると、培養初期のコンフル状態では、密できれいな感じですが、培養を続けていくと、
1:細胞と同じほどの大きさの空胞?隙間?みたいな像
2:培養シャーレの側から剥がれてくることがある
ということでスムーズに培養が進みません。

皆様はcaco-2細胞の培養でどのような工夫をされていますでしょうか。
また、光学顕微鏡で観察する時の細胞の接着面が分厚くなっても、それはTJ形成の指標にはならないのでしょうか。
ご教授いただけたら幸いです。
 
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(無題) 削除/引用
No.3436-2 - 2014/10/06 (月) 13:34:28 - おお
>[Re:1] TJさんは書きました :

> また、光学顕微鏡で観察する時の細胞の接着面が分厚くなっても、それはTJ形成の指標にはならないのでしょうか。
> ご教授いただけたら幸いです。

光学顕微鏡では判別するほどの分解能がないと思いますけど、、、光学顕微鏡でそういうのを指標にするなら何か直接的な根拠が必要ではないでしょうか。

caco-2の培養方法について 削除/引用
No.3436-1 - 2014/10/06 (月) 11:54:20 - TJ
いつも勉強させていただいてます。

現在caco-2細胞を使用して、膜透過の研究をしています。
タイトジャンクションの形成には「21日間」の培養かTER値の上昇(大体1000以上?)がスタンダードと私は解釈しています。

現在caco2の培養をしていますが、培地の栄養消費が早い割に、非常に弱い細胞である印象を受けています。培養中、光学顕微鏡で細胞を観察すると、培養初期のコンフル状態では、密できれいな感じですが、培養を続けていくと、
1:細胞と同じほどの大きさの空胞?隙間?みたいな像
2:培養シャーレの側から剥がれてくることがある
ということでスムーズに培養が進みません。

皆様はcaco-2細胞の培養でどのような工夫をされていますでしょうか。
また、光学顕微鏡で観察する時の細胞の接着面が分厚くなっても、それはTJ形成の指標にはならないのでしょうか。
ご教授いただけたら幸いです。

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