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(無題) 削除/引用 No.3435-8 - 2014/10/07 (火) 09:34:57 - さく ジャーファーメンターでの培養で液内から通気・攪拌していても、対数増殖期の液中の溶存酸素はほとんどゼロになったりするので（フラスコの数倍は増えますが）、上面をなでるような通気では思ったよりも増殖は良くないかもしれません。 培養出来ないことはないでしょうから、これまでも出ているように温度、培地、通気量などを検討してみては。消泡剤を入れて攪拌の回転数を思いっきりあげてみても良いかもしれません。細胞ほど攪拌に弱くはないでしょうし。

(無題) 削除/引用 No.3435-7 - 2014/10/06 (月) 21:45:00 - おお あ、スピナーフラスコで攪拌するんですね。

(無題) 削除/引用 No.3435-6 - 2014/10/06 (月) 21:41:47 - おお >[Re:5] ささんは書きました : > > 現時点では消去法で，スピナーフラスコにフィルタを噛ましてポンプ曝気を考えています。 大腸菌もせい置しておくとそこにたまりますけどね、、、溶液が動くぐらいの空気が吹き付けられたら問題ないでしょうけどね。

(無題) 削除/引用 No.3435-5 - 2014/10/06 (月) 20:02:42 - さ おお様，中西部ポスドク様，中年様 情報ありがとうございます。 残念ながら，空調が2時間おきに自動で切られる節電仕様の施設にいるため，採用を見送ります。 なお，目的のタンパクは別の施設にいたとき，坂口フラスコで振盪培養すると，1L TB培地，16℃培養で~ 1 mg取れていました。 現時点では消去法で，スピナーフラスコにフィルタを噛ましてポンプ曝気を考えています。 他にも情報お待ちしております。よろしくお願い申し上げます。

(無題) 削除/引用 No.3435-4 - 2014/10/06 (月) 15:46:00 - 中年 タンパク質によっては可溶性を向上させるためにわざわざ低い温度で発現させることもありますよね。 それはともかく、大腸菌の培養にスピナーフラスコではエアレーションが不十分でしょう。スターラーで撹拌しながらポンプ（＋フィルター）で通気してはどうでしょうか。

(無題) 削除/引用 No.3435-3 - 2014/10/06 (月) 13:52:40 - 中西部ポスドク 2xYTとかterrific brothとかに培地を変えると大腸菌の収量が数倍になることがあります。増えが悪い場合はトライしてみて下さい。確かにもしシェイカーがあるなら室温で長時間トライすると良いと思います。30℃でも十分増えますので、少し暖房を強めてみては？

(無題) 削除/引用 No.3435-2 - 2014/10/06 (月) 13:39:17 - おお 室温が管理されている部屋なら室温で増やすという手もありますね。そうするとインキュベーターを使う必要はない。

スピナーフラスコ 削除/引用 No.3435-1 - 2014/10/06 (月) 11:50:51 - さ タンパク発現用大腸菌の培養について，知恵を拝借したく存じます。 通常，各種フラスコ（エーレンマイヤー，バッフル，坂口）中， 恒温振とう培養機を用いて培養するかと思います。 経済的な理由により恒温振盪培養機の導入が難しいため， 比較的安価なインキュベーターを用いる代替策を検討しています。 振盪の代替として，スピナーフラスコや，バッフルフラスコ+スターラーなどを 考えました。（常法はインキュベーターにシェイカーを乗せることかと思いますが， サイズが合わず断念しました。） スピナーフラスコ培養では曝気が劣り，大腸菌増殖・タンパク発現の減少が危ぶまれますが 培養経験のある方，関連する文献をご存知の方情報を頂けたらと存じます。 よろしくお願いいたします。

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