Bio Technical フォーラム

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常温で液体を固める トピック削除
No.3413-TOPIC - 2014/09/30 (火) 14:52:56 - 1234
ライブイメージングの際にサンプルが微妙に動いてずれるのを防ぐために軽くアガロース等で固める必要があります。

融点付近では温度が高すぎるためにサンプルが死んでしまいます。常温で固めたいのでデキストリンを水にとかして使用しましたが、ボルテックス程度では粒子が均一に解けないためにイメージングの時に多量のノイズが入ります。しかし、ソニケーターを使って溶かすとデキストリンの分子が切断されるためか、ゲルの粘度が下がりすぎ、サンプルを固定できません。

上記の改良法、もしくは別の方法で常温で PBS を均一に固める方法をご存知の方がいらっしゃったら教えてください。
 
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No.3413-7 - 2014/09/30 (火) 18:19:20 - mon
メチルセルロースが安価ですよ。凍結保存液にも使えますし。

(無題) 削除/引用
No.3413-6 - 2014/09/30 (火) 15:49:41 - ~
チラシで見ましたがこんなのはどうですか?
http://www.genostaff.com/products/iPGell.html

(無題) 削除/引用
No.3413-5 - 2014/09/30 (火) 15:46:56 - AP
低融点アガロースなら一度融解してしまえば、再ゲル化温度は30度付近で、室温でもかなり長時間、ゾル状態を保つはずです。。ちなみにアガロースは溶解する温度(100℃付近。融点とはいわないかなあ)より再ゲル化温度のほうがはるかに低いので普通のアガロースやアーガーでも40度くらいまでゾル状態を保てるはずです。

デキストリン、あるいはスターチ(デンプン、アミロース)なら一旦、熱を加えて溶かしたものを(つまりはデンプン糊)を冷ましてから使えばいいように思いますが。

(無題) 削除/引用
No.3413-4 - 2014/09/30 (火) 15:39:51 - flowjoe
メビオールゲルのステルスマーケティングですか?

(無題) 削除/引用
No.3413-3 - 2014/09/30 (火) 15:39:01 - ~
サンプルや使っているアガロースの融点が分かりませんが、
軟寒天培地やメチルセルロース培地は動物細胞では昔から使われていますが、そのような方法は使えないのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.3413-2 - 2014/09/30 (火) 14:55:16 - AA
スライス培養でタイムラプス観察をしている人が、
マトリゲルでスライスの動きを抑えていましたが
そういった方法はいかがでしょうか?

常温で液体を固める 削除/引用
No.3413-1 - 2014/09/30 (火) 14:52:56 - 1234
ライブイメージングの際にサンプルが微妙に動いてずれるのを防ぐために軽くアガロース等で固める必要があります。

融点付近では温度が高すぎるためにサンプルが死んでしまいます。常温で固めたいのでデキストリンを水にとかして使用しましたが、ボルテックス程度では粒子が均一に解けないためにイメージングの時に多量のノイズが入ります。しかし、ソニケーターを使って溶かすとデキストリンの分子が切断されるためか、ゲルの粘度が下がりすぎ、サンプルを固定できません。

上記の改良法、もしくは別の方法で常温で PBS を均一に固める方法をご存知の方がいらっしゃったら教えてください。

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