Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

パラフィン包埋 筋 トピック削除
No.3397-TOPIC - 2014/09/23 (火) 13:33:52 - 筋
パラフィン切片にて骨格筋の切片を作成したいのですが、切片を作成し、顕微鏡で観察を行うと筋線維に亀裂のようなものが入り、綺麗に撮影することができません。もし解決策があればお教えいただきたく願います。

ちなみに、パラフィンブロックの作成時間としましては、
水洗 オーバーナイト
50%、70%、80%、90%、95%、99%、100%エタノール各1時間
キシレンエタノール1:1、キシレン、キシレン、パラフィン、パラフィン、パラフィン各30分
包埋

という流れです。

よろしくお願いします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.3397-6 - 2014/09/24 (水) 19:56:51 - AA
ヒビが入ってしまっていたらもう対処法は無いと思います。

ただ、ブロックの段階でヒビがなく、切片にすると亀裂ができるのであれば、
パラフィンの伸展などに原因がある可能性がありますので、改善できうるかと思います。

(無題) 削除/引用
No.3397-5 - 2014/09/24 (水) 10:22:11 - 筋
APさん
> 筋は固定法はなんでしょうか。固定法をかえる余地はありますか?

固定法はホルマリンです。
浸漬して一週間くらいです。
変える余地はございません。

(無題) 削除/引用
No.3397-4 - 2014/09/24 (水) 10:20:42 - 筋
脱水・透パラ時に亀裂が入ってしまっているのではないでしょうか。
脱水の際の低濃度エタノールの時間を伸ばして、ゆっくりと抜いていくと
解決することがあります。

また、筋肉だと薄切時も注意が必要です。
ブロックの表面を実体顕微鏡で見て、既にヒビが入っているのかどうか
見てみると良いのではないでしょうか。

回答ありがとうございます。
もしヒビが入ってしまった場合対処法などはございますか?

(無題) 削除/引用
No.3397-3 - 2014/09/24 (水) 09:45:18 - AP
筋は固定法はなんでしょうか。固定法をかえる余地はありますか?

(無題) 削除/引用
No.3397-2 - 2014/09/23 (火) 16:05:59 - AA
脱水・透パラ時に亀裂が入ってしまっているのではないでしょうか。
脱水の際の低濃度エタノールの時間を伸ばして、ゆっくりと抜いていくと
解決することがあります。

また、筋肉だと薄切時も注意が必要です。
ブロックの表面を実体顕微鏡で見て、既にヒビが入っているのかどうか
見てみると良いのではないでしょうか。

パラフィン包埋 筋 削除/引用
No.3397-1 - 2014/09/23 (火) 13:33:52 - 筋
パラフィン切片にて骨格筋の切片を作成したいのですが、切片を作成し、顕微鏡で観察を行うと筋線維に亀裂のようなものが入り、綺麗に撮影することができません。もし解決策があればお教えいただきたく願います。

ちなみに、パラフィンブロックの作成時間としましては、
水洗 オーバーナイト
50%、70%、80%、90%、95%、99%、100%エタノール各1時間
キシレンエタノール1:1、キシレン、キシレン、パラフィン、パラフィン、パラフィン各30分
包埋

という流れです。

よろしくお願いします。

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。