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パラフィン包埋 筋
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No.3397-TOPIC - 2014/09/23 (火) 13:33:52 - 筋
パラフィン切片にて骨格筋の切片を作成したいのですが、切片を作成し、顕微鏡で観察を行うと筋線維に亀裂のようなものが入り、綺麗に撮影することができません。もし解決策があればお教えいただきたく願います。
ちなみに、パラフィンブロックの作成時間としましては、
水洗 オーバーナイト
50%、70%、80%、90%、95%、99%、100%エタノール各1時間
キシレンエタノール1:1、キシレン、キシレン、パラフィン、パラフィン、パラフィン各30分
包埋
という流れです。
よろしくお願いします。
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(無題)
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No.3397-6 - 2014/09/24 (水) 19:56:51 - AA
ヒビが入ってしまっていたらもう対処法は無いと思います。
ただ、ブロックの段階でヒビがなく、切片にすると亀裂ができるのであれば、
パラフィンの伸展などに原因がある可能性がありますので、改善できうるかと思います。
(無題)
削除/引用
No.3397-5 - 2014/09/24 (水) 10:22:11 - 筋
APさん
> 筋は固定法はなんでしょうか。固定法をかえる余地はありますか?
固定法はホルマリンです。
浸漬して一週間くらいです。
変える余地はございません。
(無題)
削除/引用
No.3397-4 - 2014/09/24 (水) 10:20:42 - 筋
脱水・透パラ時に亀裂が入ってしまっているのではないでしょうか。
脱水の際の低濃度エタノールの時間を伸ばして、ゆっくりと抜いていくと
解決することがあります。
また、筋肉だと薄切時も注意が必要です。
ブロックの表面を実体顕微鏡で見て、既にヒビが入っているのかどうか
見てみると良いのではないでしょうか。
回答ありがとうございます。
もしヒビが入ってしまった場合対処法などはございますか?
(無題)
削除/引用
No.3397-3 - 2014/09/24 (水) 09:45:18 - AP
筋は固定法はなんでしょうか。固定法をかえる余地はありますか?
(無題)
削除/引用
No.3397-2 - 2014/09/23 (火) 16:05:59 - AA
脱水・透パラ時に亀裂が入ってしまっているのではないでしょうか。
脱水の際の低濃度エタノールの時間を伸ばして、ゆっくりと抜いていくと
解決することがあります。
また、筋肉だと薄切時も注意が必要です。
ブロックの表面を実体顕微鏡で見て、既にヒビが入っているのかどうか
見てみると良いのではないでしょうか。
パラフィン包埋 筋
削除/引用
No.3397-1 - 2014/09/23 (火) 13:33:52 - 筋
パラフィン切片にて骨格筋の切片を作成したいのですが、切片を作成し、顕微鏡で観察を行うと筋線維に亀裂のようなものが入り、綺麗に撮影することができません。もし解決策があればお教えいただきたく願います。
ちなみに、パラフィンブロックの作成時間としましては、
水洗 オーバーナイト
50%、70%、80%、90%、95%、99%、100%エタノール各1時間
キシレンエタノール1:1、キシレン、キシレン、パラフィン、パラフィン、パラフィン各30分
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という流れです。
よろしくお願いします。
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