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(無題) 削除/引用 No.330-3 - 2012/03/23 (金) 10:42:17 - Q ＞ノックアウトマウスのTailからゲノムを抽出してサザンブロットを すると、バンドが全くでません。 ＞余談ですが、他の遺伝子のノックアウトマウスだと、Tailから 同様のゲノム抽出法でサザンのバンドが確認できました。 なので、抽出方法には問題ないと考えています。 総合すると、ノックアウトマウスではないのでは？

(無題) 削除/引用 No.330-2 - 2012/03/23 (金) 10:19:09 - ~ ES細胞由来のゲノムDNAとノックアウトマウス由来のDNAは、同じメンブレンに乗っているのでしょうか？ また、再現性がある現象なのでしょうか？ それと、キメラではなくノックアウトマウスになっているのですよね？ Tm値とインキュベート温度があまりあっておらず、それが検出される時とされない時の境目になっている？

サザンのバンド検出 削除/引用 No.330-1 - 2012/03/22 (木) 18:49:43 - サザンオヤジスターズ 現在、ノックアウトマウスを作製しており、組み換え体の検出を サザンブロットでしています。 組み換え体のESは、容易にバンドを検出できるのですが、 ノックアウトマウスのTailからゲノムを抽出してサザンブロットを すると、バンドが全くでません。 Tailからフェノクロを使ってゲノムを抽出しているのですが、 ゲノム量は十分にあるのにバンドがなぜか何もでません。 このような体験をされた方っておられますか？ 何が原因なのかさっぱり分かりません。 余談ですが、他の遺伝子のノックアウトマウスだと、Tailから 同様のゲノム抽出法でサザンのバンドが確認できました。 なので、抽出方法には問題ないと考えています。

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