全2件 ( 1 〜 2 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.3274-2 - 2014/08/05 (火) 20:32:34 - AP もちろん分解されるでしょう。古典的なRNA精製法のあるものでは、RNaseを消化・不活性化するためにProK処理をします。 まあ、ProKも二時間反応後では自己消化して力価が下がっているかもしれず、RNaseは比較的丈夫かつ強い力価があるので十分量加えればProKで完全に全滅する前に、十分にRNAを分解してくれるかもしれず、ベストな条件でないにしても、プラクティカルには問題ないのではないかと思います。 プラスミドミニプレップでも、最近のキットでは最初の懸濁バッファーにRNaseをいれているでしょう。あれも理屈から言うと、強アルカリ/SDS存在下では活性が阻害される、または失活していくはずで、最初見たときにはへんなのー、と思ったものです（古典的なアルカリSDS法では、精製したプラスミドを溶かす液に入れます）。プラクティカルにはそれでOKで（通常のwarking concより濃くいれているみたいですが）、利便性がよいのでしょうね。

ProKとRNaseA 削除/引用 No.3274-1 - 2014/08/05 (火) 17:10:04 - はる こんにちは。 現在、DNAサンプルを調製する過程で、 ProteinaseK処理を65℃で2時間した後に RNaseAを添加して37℃で30分間RNase処理 してるのですが、ふとProteinaseが入っているところにRNaseを添加しても分解されてしまうのではないかと疑問に思いました。 少し調べてみたのですが、ProKの説明には大多数の核酸分解酵素を分解する との説明が書かれてはいましたが、RNaseAを分解するのかしないのかはわかりませんでした。 いくつかのプロトコルでProK処理後にRNaseA処理をそのまま行っているものがありましたので、分解されないような気がするのですが・・・ また、反応温度の違いによりProKが働かないのかなとも思っております。 ご存知の方がいらっしゃいましたら教えてください。 よろしくお願いいたします。

全2件 ( 1 〜 2 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---