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Alexa Fluor二次抗体の保存方法について トピック削除
No.3252-TOPIC - 2014/07/29 (火) 07:25:12 - ラビ
始めまして、トピック失礼します。少しずれた内容かもしれませんが、検索が行き詰ってしまったので皆さんのアドバイスを頂けると嬉しいです。

免疫染色の二次抗体にAlexa Fluor(life Tech)をラボで共用利用しているのですが、現在それを分注せずに4度で長期間(6〜12ヶ月、ライトは日中常についている状態)、しかも半透明のプラスチック容器内でそれ以上特別遮光もせずに保存して使おうと言う意見が出ています。多分他のラボがそうしていて、その方が簡単だからという理由です。

これまでは説明書どおり、分注してー20度に遮光して保存していて問題なかったのですが、他のラボがそうしているということでどうもそのやり方になってしまいそうな勢いです。

本当なら問題ないのですが、私の調べた限りではその保存方法はどこにも提示されておらず、特に遮光もしなくて良い、ということには懐疑的です。でももしかしたら結構一般的なことなのかな?とも思い、みなさんのアドバイスをもらえたらと思いました。

Alexa Fluor二次抗体(life Tech)は売っている状態で4度に長期間、完全な遮光をせずに保存できるものなのでしょうか?もしご存知の方がいたら6ヶ月ぐらいは安定だったなどの情報を頂けると幸いです。

よろしくお願いいたします。
 
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参考データ 解決済み 削除/引用
No.3252-9 - 2014/07/29 (火) 22:00:33 - ラビ
コメントしてくださった皆様ありがとうございます。本日−20度で1年近く保存していた抗体と、4度で半遮光状態で6ヶ月近く保存していた抗体の比較がでましたので参考までにここにご報告したいと思います。

4度で半遮光状態で6ヶ月ほど保存しておくと蛍光強度は10−30%に減衰すると言う事が解りました。ただ、一次抗体がいいやつだった場合は細胞内局在はちゃんと観察できるレベルでした。ですので、遮光保存していたら何ら問題は無かったように思われます。

ちょっとでも参考になれば幸いです。ありがとうございました。

ご意見ありがとうございます 削除/引用
No.3252-8 - 2014/07/29 (火) 18:10:55 - ラビ
皆様素早いコメントありがとうございます。大変参考になります。

4度で遮光保存というのが一般的なのですね。半透明の箱ではなく、遮光には気をつけた方がいいみたいだと進言してみます。

(無題) 削除/引用
No.3252-7 - 2014/07/29 (火) 17:48:08 - あ
4度で遮光できる箱で保存してます。

本当はー20度で遮光が一番良いとは思ってます。気になるなら、自分用に一部小分けしてー20度で遮光したらどうでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.3252-6 - 2014/07/29 (火) 10:12:50 - よっしー
紙のフリーズボックスに入れて,冷蔵庫保存していました.
これで十分な遮光になっていると思います.
もちろん使うときは,取り出してすぐ使いそのまますぐに冷蔵庫に戻していました.

(無題) 削除/引用
No.3252-5 - 2014/07/29 (火) 09:43:15 - あれ
追記ですが、これまでいろいろな方法で保存されていたAlexa標識抗体を使いましたが、どれでも大丈夫でした(いずれも遮光)。

1. 4度保存
2. 分注して-80度保存、解凍後は4度保存
3. 終濃度50%グリセリンを入れて-20度保存

最近の標識抗体のマニュアルには下記の記載があります。
* For longer storage, divide the solution into single-use aliquots and freeze at ≤–20°C. Frozen aliquots are stable for at least 6 months. Avoid repeated freezing and thawing.

保存温度よりも、凍結融解と遮光に気をつけた方がよいと思います。

(無題) 削除/引用
No.3252-4 - 2014/07/29 (火) 08:36:17 - L
私のラボにも、4度で3年以上置いてあるalexa二次抗体がありますが(遮光はしてます)、特に問題なく免染できてます。逆に、分注して−20度で保存するよう勧められている事を知らなかったです。もしその方が良いのであれば保存方法を変えた方がいいのかな?

(無題) 削除/引用
No.3252-3 - 2014/07/29 (火) 08:14:57 - あれ
たしか10年くらい前のAlexaは説明書に4度保存推奨で冷凍不可の記載があった記憶があります。
単に凍結融解を繰り返さないためのようにも思いますが。
今のマニュアルを見てみると、分注して-20度保存を推奨してますね。いずれにしても凍結融解を繰り返さない事を重視しているようです。
うちでは、4度で遮光して保存してますが、特に問題はないです。数年保存したものと新品を比べてないので、新品と比べてシグナルが下がっているのかもしれませんが、検出に不都合を感じた事はありません。
ただし、遮光はしたほうがよいです。

(無題) 削除/引用
No.3252-2 - 2014/07/29 (火) 07:52:04 - 独り言
前のラボはすべて4度においてました。何年もおいてたけど、日常的に免疫染色してた。遮光はできる箱だった。

Alexa Fluor二次抗体の保存方法について 削除/引用
No.3252-1 - 2014/07/29 (火) 07:25:12 - ラビ
始めまして、トピック失礼します。少しずれた内容かもしれませんが、検索が行き詰ってしまったので皆さんのアドバイスを頂けると嬉しいです。

免疫染色の二次抗体にAlexa Fluor(life Tech)をラボで共用利用しているのですが、現在それを分注せずに4度で長期間(6〜12ヶ月、ライトは日中常についている状態)、しかも半透明のプラスチック容器内でそれ以上特別遮光もせずに保存して使おうと言う意見が出ています。多分他のラボがそうしていて、その方が簡単だからという理由です。

これまでは説明書どおり、分注してー20度に遮光して保存していて問題なかったのですが、他のラボがそうしているということでどうもそのやり方になってしまいそうな勢いです。

本当なら問題ないのですが、私の調べた限りではその保存方法はどこにも提示されておらず、特に遮光もしなくて良い、ということには懐疑的です。でももしかしたら結構一般的なことなのかな?とも思い、みなさんのアドバイスをもらえたらと思いました。

Alexa Fluor二次抗体(life Tech)は売っている状態で4度に長期間、完全な遮光をせずに保存できるものなのでしょうか?もしご存知の方がいたら6ヶ月ぐらいは安定だったなどの情報を頂けると幸いです。

よろしくお願いいたします。

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