Bio Technical フォーラム

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2’,7’-ジクロロフルオレシンジアセタート染色 トピック削除
No.3237-TOPIC - 2014/07/24 (木) 12:12:54 - o2

2種の細胞内の活性酸素の量を比較したいのですが。
2’,7’-ジクロロフルオレシンジアセタート染色で活性酸素種の蓄積を評価したとの記載を目にしました。
この方法についてご存知の方はいらっしゃいますでしょうか?
よく使われる、フローサイトメトリーの方法のが簡単で確実でしょうか?

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.3237-2 - 2014/07/24 (木) 13:12:42 - おお
ROSの種類などについては、この試薬二関しては詳しくないけど検出できないものもあるから、それぞれ試薬ごとに調査しないとあとで必要なものが図れてなかったりするかもしれないので、調べておいた方がいいと思います。おそらくその試薬はH2O2には直接反応しなかったはず。

原理的には細かいところはおいておいて、膜浸透をよくするためにエステルかされていて、細胞内でCH3COOの部分がエステラーぜにきられて、細胞内にとどまることができるようになっているはず。

細胞内でROSのアッタックを受けると蛍光活性が上がるので蛍光でROSが測定できる。なのであなたの環境で蛍光が測定できる方法で組み立てる事も可能なはず。フローサイトメトリーでも図れるんじゃないか。細胞にかけていんキュベーとしてフローサイトメトリーにかけるだけだと思うけど。

2’,7’-ジクロロフルオレシンジアセタート染色 削除/引用
No.3237-1 - 2014/07/24 (木) 12:12:54 - o2

2種の細胞内の活性酸素の量を比較したいのですが。
2’,7’-ジクロロフルオレシンジアセタート染色で活性酸素種の蓄積を評価したとの記載を目にしました。
この方法についてご存知の方はいらっしゃいますでしょうか?
よく使われる、フローサイトメトリーの方法のが簡単で確実でしょうか?

よろしくお願いします。

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