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(無題) 削除/引用 No.3197-5 - 2014/07/09 (水) 09:34:45 - ~ 繊維状のものは、壊れた細胞から出てきたゲノムDNAかもしれません。 その場合は、DNaseを含むバッファーで洗うことで、細胞をほぐすことができます。

(無題) 削除/引用 No.3197-4 - 2014/07/08 (火) 12:21:03 - vvv ご回答頂きありがとうございます。 パーコール法と、最後にフィルターをかける法どちらも試してみて収量の多い方を採用させて頂きます。 ありがとうございました。

でます。サイトメーターかける前に 削除/引用 No.3197-3 - 2014/07/07 (月) 21:27:08 - ema ＞コラゲナーゼでバラバラ でダメージを受けて、最初のフィルター時はある程度大丈夫だったものも工程が進むにつれて死んでアグリゲーションを起こすようで、やっていたころよく出ました。 抗体染色終了してFACSにかける前に40μmフィルターを通すのが一番労力かからないと思います。

(無題) 削除/引用 No.3197-2 - 2014/07/07 (月) 19:04:29 - おお パーコールなどで細胞を分離するというのはどうでしょうか。

40μmフィルター通過後の大きな不溶物について 削除/引用 No.3197-1 - 2014/07/07 (月) 18:45:32 - vvv いつも勉強させて頂いています。 組織をコラゲナーゼでバラバラの細胞にし、PBSで2回洗浄（遠心＆懸濁）後、40μmフィルターでろ過しました。 それを1200rpm・5分で遠心すると、沈殿が得られ、PBSで懸濁したところ、わずかに見える細かい細胞の動きとともに、フィルターより明らかに大きな繊維状のものがたくさん出てきました。 これは何なのでしょうか？ 洗う度にも出てくるのですが、きれいに除くことはできないのでしょうか？ ちなみに、その後これらを免染後、フローサイトメトリーにかけたいと考えています。 どうぞ宜しくお願いします。

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