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「マウス」赤血球の特異的マーカー トピック削除
No.3184-TOPIC - 2014/07/03 (木) 15:45:44 - aa
マウス赤血球のマーカーを探しています。
用途はFAですので表面マーカーが良いかと思います。

目的としては他動物の赤血球が混じっているサンプルでマウス赤血球のみを特異的に検出することです。
標識の有無、ターゲット蛋白質(エピトープ)は問いません。

マウスは免疫不全系、他動物は実名出せませんが一般的哺乳類(ヒト・げっ歯類ではない)となります。

ご指導のほど何卒よろしくお願い申し上げます。
 
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No.3184-7 - 2014/07/04 (金) 05:07:02 - L
とりあえず、マウス赤血球マーカーの抗体(TER119やGlycophorin-Aなど)で、その動物の末梢血を染めてみて、反応しない抗体を探してみれば? 見つかれば、forward scatter/side scatterを調整して、血小板や白血球とは異なる場所に赤血球が検出される条件を探し、ゲートをかけて解析すれば良い。赤血球マーカーは有核の赤芽球系細胞にも発現しているだろうから、気になるのであれば、核染色を併用して有核細胞をゲートアウトできる(網状赤血球をどうするかによって、色素の選択とゲートの位置が変わるかもしれない)。

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No.3184-6 - 2014/07/04 (金) 01:50:36 - おお
ポリくろならその動物の赤血球をとってきて、吸収して反応しないフラクションをとってくるというのは可能かもしれない。

まずターゲットにする表面抗原をリストアップしてペプチドにたいする抗体をさがし、そのペプチドが考えている動物で保存されているか調べていく。

(無題) 削除/引用
No.3184-5 - 2014/07/03 (木) 22:22:26 - おお
あ、とんだかんちがいしてました、、、

(無題) 削除/引用
No.3184-4 - 2014/07/03 (木) 16:50:49 - ~
識別したい動物名を言えない以上、どの抗体ならばその識別ができたという体験談を聞くことはできませんし、
マウスにあって、その動物にないマーカーを言える人もいないでしょう。

識別したいのは、
・マウス赤血球
・マウス非赤血球
・非マウス赤血球
・非マウス非赤血球
のうちのマウス赤血球ですよね。

素直に考えると、
1.マウス赤血球マーカー(CD235a等)を認識し、言えない動物の赤血球は認識しない抗体で検出する

2.赤血球マーカー(両動物の赤血球と認識)、マウスマーカー(マウスの血球のみを認識)を組み合わせて検出する

3.赤血球以外の不要な細胞をできる範囲で除き、そのサンプル中ではマウス赤血球しか認識しない抗体で検出する

などでしょうか。

(無題) 削除/引用
No.3184-3 - 2014/07/03 (木) 16:07:09 - qw
識別する動物種を出さないで、マウスのRBCに特異的な抗体を聞いていると理解してよいのかな?
genericな提案としては、その動物でマウス赤血球を免疫して、抗体を作成したらいいんじゃない?

(無題) 削除/引用
No.3184-2 - 2014/07/03 (木) 15:53:03 - おお
ちょっとしろうとのあいであなんだが、ヘムの蛍光を直で検出できないのか、、、

「マウス」赤血球の特異的マーカー 削除/引用
No.3184-1 - 2014/07/03 (木) 15:45:44 - aa
マウス赤血球のマーカーを探しています。
用途はFAですので表面マーカーが良いかと思います。

目的としては他動物の赤血球が混じっているサンプルでマウス赤血球のみを特異的に検出することです。
標識の有無、ターゲット蛋白質(エピトープ)は問いません。

マウスは免疫不全系、他動物は実名出せませんが一般的哺乳類(ヒト・げっ歯類ではない)となります。

ご指導のほど何卒よろしくお願い申し上げます。

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