Bio Technical フォーラム

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PolIIプロモーターの下流にIRES トピック削除
No.3154-TOPIC - 2014/06/25 (水) 18:14:23 - vRdRp
ある蛋白質を、プラスミドベースで哺乳類細胞(HEK293細胞等)に多めに発現させたいと考えています。CMVプロモーターなどの下流に、IRES配列を加えると、IRES配列が無い場合に比べて、蛋白質の翻訳効率が亢進し、発現量が増加するというようなことはないでしょうか？
mRNA cap依存性翻訳とIRES依存性翻訳の効果が重なって翻訳効率が増強しないでしょうか？
経験のある方、あるいは参考資料などご存知の方、ご教授いただけると幸いです。
　
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(無題) 削除/引用
No.3154-4 - 2014/06/30 (月) 19:45:32 - mon
CMVとWPREと組み合わせた発現ベクターは市販されていますね（レンチウィルスベクターではメジャーです）。
http://www.lifetechnologies.com/order/catalog/product/A14697

(無題) 削除/引用
No.3154-3 - 2014/06/30 (月) 09:50:55 - vRdRp
お返事いただきありがとうございます。
私の系ではWPREが有効かもしれません。
この配列をmRNAの3'UTRに加えることを検討してみます。

(無題) 削除/引用
No.3154-2 - 2014/06/26 (木) 06:17:56 - mon
HTLV-R, Intron(actin-bGlobin hybrid), WPRE, S/MARも効果ありますよ。
TAKARAで売り出した、HIV-TAR/TATシステムも強力なようです。

PolIIプロモーターの下流にIRES 削除/引用
No.3154-1 - 2014/06/25 (水) 18:14:23 - vRdRp
ある蛋白質を、プラスミドベースで哺乳類細胞(HEK293細胞等)に多めに発現させたいと考えています。CMVプロモーターなどの下流に、IRES配列を加えると、IRES配列が無い場合に比べて、蛋白質の翻訳効率が亢進し、発現量が増加するというようなことはないでしょうか？
mRNA cap依存性翻訳とIRES依存性翻訳の効果が重なって翻訳効率が増強しないでしょうか？
経験のある方、あるいは参考資料などご存知の方、ご教授いただけると幸いです。
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