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メンブレン上の総タンパク染色試薬の選択について トピック削除
No.3150-TOPIC - 2014/06/25 (水) 11:01:11 - aa
メンブレン上の総タンパクを染色するのにお勧めの試薬はありますか?

Deep Purpleの使用を考えていたのですが、現在販売中止になっている模様で、代わりにSYPRO ルビーを使用しようと思っていますが、あまり染まりが良くないと聞いています。

なるべく検出感度が良いものを探しています。もしよろしければ教えてください。
 
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順番 削除/引用
No.3150-5 - 2014/06/25 (水) 16:33:24 - ema
>使用しているメンブレンはPVDF膜で、メンブレン上のタンパク染色後に特異的抗体での検出も行う予定です。

染色をすると特異抗体での検出にばらつきがでることがあります。
どうせサンプルの追加もできないのですがら抗体で検出後(ECLか何か?)染色をしては?

ただ過去ログをみていると
http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech/biotechforum.cgi?mode=view;Code=4268
の話があるので注意してください。
上記の現象はお互いに関連していると思います。先に染色するとまだらにマスキングが発生することがあるし、あとで染色するとついた抗体(??これもほんとはどんな現象かは判りませんが)の分の誤差がある、ってことかしら。

(無題) 削除/引用
No.3150-4 - 2014/06/25 (水) 13:13:23 - aa
質問への返答ありがとうございます。

書き忘れた事があったので、追記します。

使用しているメンブレンはPVDF膜で、メンブレン上のタンパク染色後に特異的抗体での検出も行う予定です。

使ってないのですが 削除/引用
No.3150-3 - 2014/06/25 (水) 12:38:26 - ema
http://www.bio-rad.com/ja-jp/product/total-protein-blot-stains
私は染める場合はCBBで行って、それ以上の補正はERK2だのActinだのの検出補正でしているので試してないですが、ニトロセルロースでなくPVDFなら金コロイドが感度よさそうです。

(無題) 削除/引用
No.3150-2 - 2014/06/25 (水) 11:57:31 - おお
サンプルもらえないか交渉してみたらどうでしょうかねぇ、、、

メンブレン上の総タンパク染色試薬の選択について 削除/引用
No.3150-1 - 2014/06/25 (水) 11:01:11 - aa
メンブレン上の総タンパクを染色するのにお勧めの試薬はありますか?

Deep Purpleの使用を考えていたのですが、現在販売中止になっている模様で、代わりにSYPRO ルビーを使用しようと思っていますが、あまり染まりが良くないと聞いています。

なるべく検出感度が良いものを探しています。もしよろしければ教えてください。

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