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Trypan Blue viability トピック削除
No.3140-TOPIC - 2014/06/21 (土) 02:22:03 - おお
Trypan Blueをつかってマンマルの細胞のviabilityを測ろうとしてます。簡単に数値化するためにtrypan blue量をOD値で測ろうとしてます。

細胞のけんだく液にtrypan blueをくわえて、えんしんして細胞に取り込まれてないtrypan blueを除こうとしてますが、遠心したペレットにフリーのtrypan blueのでぶりが蓄積しているようです。

こういうでぶりが出ないようにする工夫とか、手ぶりが出る原因とかご存じの方がいませんでしょうか。
 
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No.3140-5 - 2014/06/21 (土) 07:59:02 - おお
>[Re:4] qwさんは書きました :
> あなたの説明される方法で測定する値は、viability生存率ではなく、死細胞数でしょうから、別の方法で全細胞数を測定する必要がありそうですがいかがでしょうか?

そこは全体的な実験の方法論なので。細かく書くのは一応避けたいということでご了承ください。
しいてこの状況でできることはけんだく液を2等分などにわけて、一方は全部の細胞にダメージをあたえるっていうのはできると思います。

> トリパンブルーを使うviability測定は顕微鏡観察の方が楽なのではないでしょうか?
>

今の状況ではそれがベターかもしれません。ありがとうございました。

(無題) 削除/引用
No.3140-4 - 2014/06/21 (土) 06:57:01 - qw
あなたの説明される方法で測定する値は、viability生存率ではなく、死細胞数でしょうから、別の方法で全細胞数を測定する必要がありそうですがいかがでしょうか?
別途、全細胞に穴を開けてトリパンブルーで完全染色するのは、困難な感触です。
トリパンブルーを使うviability測定は顕微鏡観察の方が楽なのではないでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.3140-3 - 2014/06/21 (土) 04:17:42 - おお
そうですね。フィルターか遠心で先に除くといいかもしれません。そう言うのを含めいろいろ経験された話をあつめています。

(無題) 削除/引用
No.3140-2 - 2014/06/21 (土) 03:35:20 - 思いつき
trypan blueをフィルターしてから、細胞に加えるとかどうでしょうか?

Trypan Blue viability 削除/引用
No.3140-1 - 2014/06/21 (土) 02:22:03 - おお
Trypan Blueをつかってマンマルの細胞のviabilityを測ろうとしてます。簡単に数値化するためにtrypan blue量をOD値で測ろうとしてます。

細胞のけんだく液にtrypan blueをくわえて、えんしんして細胞に取り込まれてないtrypan blueを除こうとしてますが、遠心したペレットにフリーのtrypan blueのでぶりが蓄積しているようです。

こういうでぶりが出ないようにする工夫とか、手ぶりが出る原因とかご存じの方がいませんでしょうか。

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