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protein precipitation トピック削除
No.3136-TOPIC - 2014/06/18 (水) 03:52:25 - おお
After TCA precipitation got popular, various methods came out to precipitate proteins from mixed protein samples in order to get total proteins: acetone precipitation, chloroform-methanol precipitation, TCA/acetone precipitation, etc. And it seems each method has some variations.

I was wondering if you know differences among these methods. What are these methods good at and bad at? Is there any experience that you can not precipitate proteins of your interest? How to choose the best one for my experiments among them.

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No.3136-5 - 2014/06/18 (水) 16:17:50 - おお
>[Re:4] flowjoeさんは書きました :
> 膜タンパクなど界面活性剤が入ってると硫安沈殿やペグ沈は効きます?

Phase separation of liquid detergents such as Triton X-100 would occur under high salt conditions. Some hydrophobic proteins may be trapped in the detergent phase. If the detergent is powder, it may precipitate by addition of high salt. These results could be expected with anmonium sulphate.

(無題) 削除/引用
No.3136-4 - 2014/06/18 (水) 12:23:22 - flowjoe
膜タンパクなど界面活性剤が入ってると硫安沈殿やペグ沈は効きます?
最近、膜酵素ばかり扱っていて苦戦中です。

有機溶媒沈殿は糖が沈殿するので、それを避けたい場合TCAを用いています。ゲル濾過でもいいのかもしれませんが、その方が多検体扱い易い。例えばレクチンカラムでハプテン糖を多く含むサンプル等。

(無題) 削除/引用
No.3136-3 - 2014/06/18 (水) 08:07:52 - おお
>変性してもよく、電気泳動で分析するための沈殿方法ということですか。

Yes.

Thank you for the comment.

(無題) 削除/引用
No.3136-2 - 2014/06/18 (水) 04:10:16 - ほし
変性してもよく、電気泳動で分析するための沈殿方法ということですか。硫安沈やペグ沈の方が、活性を保ったまま長期保存できる沈殿だと思ってましたけれど。アクチンはアセトン沈殿でしたっけ。

protein precipitation 削除/引用
No.3136-1 - 2014/06/18 (水) 03:52:25 - おお
After TCA precipitation got popular, various methods came out to precipitate proteins from mixed protein samples in order to get total proteins: acetone precipitation, chloroform-methanol precipitation, TCA/acetone precipitation, etc. And it seems each method has some variations.

I was wondering if you know differences among these methods. What are these methods good at and bad at? Is there any experience that you can not precipitate proteins of your interest? How to choose the best one for my experiments among them.

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