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成熟脂肪細胞に遺伝子導入 トピック削除
No.3135-TOPIC - 2014/06/17 (火) 16:34:10 - 脂肪細胞
3T3-L1を成熟脂肪細胞に分化させてから、ルックベクターを導入しようと考えています。

文献を調べたところ、リポフェクトアミン2000を用いて成功した論文があり、そのプロトコルに従ってトランスフェクションを試みましたが、蛍光が検出できませんでした。

リポフェクトアミンを用いる以外の方法で、遺伝子導入できる方法をご存知の方がいらっしゃいましたら、ご教授いただけるとありがたいです。
 
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(無題) 削除/引用
No.3135-2 - 2014/06/17 (火) 20:11:48 - Harmonia
蛍光と書いていますがluciferase活性検出の意味ですよね?

たとえば、CAG promoter のEGFPを使って、ご自身の導入方法をバリデー
ションしてみては?
Luc活性検出だと、遺伝子導入できているけど活性を計るところで失敗し
ても、導入できていないと勘違いするわけなので。

成熟脂肪細胞に遺伝子導入 削除/引用
No.3135-1 - 2014/06/17 (火) 16:34:10 - 脂肪細胞
3T3-L1を成熟脂肪細胞に分化させてから、ルックベクターを導入しようと考えています。

文献を調べたところ、リポフェクトアミン2000を用いて成功した論文があり、そのプロトコルに従ってトランスフェクションを試みましたが、蛍光が検出できませんでした。

リポフェクトアミンを用いる以外の方法で、遺伝子導入できる方法をご存知の方がいらっしゃいましたら、ご教授いただけるとありがたいです。

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