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凍結細胞の生存率
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No.3126-TOPIC - 2014/06/11 (水) 23:37:23 - 単細胞
凍結細胞の生存率についてお尋ねします。
凍結細胞を解凍し、その生存率を測りたいのですが、解凍して細胞保存液に浮遊している細胞をすぐに10倍量の培地に移して希釈してから、生細胞数と死細胞数を測るのが良いのでしょうか?
それとも、解凍して細胞保存液に細胞が浮遊している状態で生細胞、死細胞をカウントする方が良いのでしょうか?
細胞のためには、早く培地中に移した方が良いと思うのですが、細胞浮遊駅のままで数えた方が良いという人もいるので、どちらが正しいのか分りません。
よろしくお願いします。
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No.3126-4 - 2014/06/12 (木) 06:48:46 - mon
解凍して直ぐにtrypan blueで「生細胞、死細胞をカウント」だと、dishに蒔いたときの生存率より、高い数値になりますよ。もっとも同様な傾向にはなりますが。
一晩培養してのちの細胞数で調べることにより正確な生存率が得られます。
凍結細胞の生存率
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No.3126-3 - 2014/06/12 (木) 00:00:06 - 単細胞
おお様
早速にありがとうございます。
そうですね、やはり細胞浮遊液を培地で希釈して、できれば遠心して、細胞保存液を除くことが大切ですね。
ありがとうございました。
先の投稿で、間違いました。
「細胞浮遊駅のままで」→「細胞浮遊液のままで」です。
すみませんでした。
(無題)
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No.3126-2 - 2014/06/11 (水) 23:43:49 - おお
解凍したとき、凍結保存液にある成分(DMSOなど)の毒性を避けるために即座に希釈、遠心して除くのが通常のやり方と思っています。希釈だけで十分に凍結保存液の影響が無視できるようであれば、希釈するだけの人もいるとはおもいます。
凍結細胞の生存率
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No.3126-1 - 2014/06/11 (水) 23:37:23 - 単細胞
凍結細胞の生存率についてお尋ねします。
凍結細胞を解凍し、その生存率を測りたいのですが、解凍して細胞保存液に浮遊している細胞をすぐに10倍量の培地に移して希釈してから、生細胞数と死細胞数を測るのが良いのでしょうか?
それとも、解凍して細胞保存液に細胞が浮遊している状態で生細胞、死細胞をカウントする方が良いのでしょうか?
細胞のためには、早く培地中に移した方が良いと思うのですが、細胞浮遊駅のままで数えた方が良いという人もいるので、どちらが正しいのか分りません。
よろしくお願いします。
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