Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

同じ動物種の抗体どうしの免染は可能ですか トピック削除
No.306-TOPIC - 2012/03/17 (土) 16:54:51 - 芯
いつもお世話になっております。

現在マウス組織の免疫染色を行っています。染めたい二つの抗体が両方ともラビットの抗体で、しかも両方とも良い抗体だし、あまり時間的余裕がないので、できたらそのまま一緒に染めたいですが、何か一緒に染められる方法はありませんか?

どうぞ宜しくお願いいたします。
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.306-6 - 2012/03/19 (月) 09:07:50 - 組織
同一細胞での共局在を示したいという前提で。2つの抗原の細胞内局在が異なっていれば(細胞質vs核、細胞膜vs細胞質など)、発色法での二重染色も可能です。

ニチレイのHP「技術情報:技術レポート」の三重染色の項を参照ください。
http://www.nichirei.co.jp/bio/technical/index.html

もし局在が重なっているのであれば、すでにご指摘があるようにラベル抗体を用いた直接法を選んだほうがいいでしょうね。

(無題) 削除/引用
No.306-5 - 2012/03/17 (土) 21:24:15 - 芯
>月詠様
 ご提案どうもありがとうございます。
 シグナルが弱まるだけで、特異性が変わらないようでしたら一次抗体だけをそれぞれ標識してそめてみる価値はあると思います/

>KY
コメントどうもありがとうございます。
 何故、まずこのプールの中で調べること思い出せなかったんだろう?!頭が悪いとしか言えないですね/

>反リア充
 アドバイスどうもありがとうございます。
 連続切片でそれぞれの抗体を染めてからの並べ方についてもう少し教えていただけませんか?面白そうなので一度やってみたいですが/

(無題) 削除/引用
No.306-4 - 2012/03/17 (土) 20:05:05 - 反リア充


306-2のサジェスチョンが確かにまずは考えられる妥当な対応策だな。でも感度downとか、化学修飾伴うラベル時に何かよろしくない事が起きて抗体の活性が変になる危険性も懸念されるので、特に高い抗体だと決断にはちょっと勇気がいるな。

もしもコローカライセーションとか示したいというこなら、連続切片で標本2枚作ってそれぞれの抗体で染めて、それを2つをならべればどうよ。たしか質問と同じようなケースで、そういうふうな示し方してるのはみたことあるよ。

同じ切片で抗体を順番に使う(1個目やったあとにその抗体をはずして、次2個目みたいな感じらしい)というのも聞いた事あるけど、なんかそれで上手く言ったという話も聞かない。

(無題) 削除/引用
No.306-3 - 2012/03/17 (土) 19:56:11 - KY
なんだか最近同じような質問があったような。

http://www.kenkyuu2.net/cgi-biotech2011/biotechforum.cgi?mode=view;Code=975

基本的に無茶な注文ですけど… 削除/引用
No.306-2 - 2012/03/17 (土) 18:07:13 - 月詠
最近は蛍光強度が強くて退色しにくい蛍光色素がたくさんありますから、多少シグナルは弱まりますけど、それぞれの抗体を異なる蛍光色素で直接標識(プレラベル)してしまってはいかがですか?
「良い抗体」というのが検出感度と特異性に優れているという意味でしたら、二次抗体を用いる間接標識法でなくてもなんとかなるかもしれません。

抗体ラベル用の蛍光標識キットも数社から販売されていると思います。

同じ動物種の抗体どうしの免染は可能ですか 削除/引用
No.306-1 - 2012/03/17 (土) 16:54:51 - 芯
いつもお世話になっております。

現在マウス組織の免疫染色を行っています。染めたい二つの抗体が両方ともラビットの抗体で、しかも両方とも良い抗体だし、あまり時間的余裕がないので、できたらそのまま一緒に染めたいですが、何か一緒に染められる方法はありませんか?

どうぞ宜しくお願いいたします。

6件 ( 1 〜 6 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。