全9件 ( 1 〜 9 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

(無題) 削除/引用 No.2982-9 - 2014/04/21 (月) 20:31:04 - さいぼー >monさん なるほど、紙で吸収ですか！ 遠心で細胞が壊れるようでしたらぜひやってみます。ありがとうございます。

(無題) 削除/引用 No.2982-8 - 2014/04/21 (月) 12:21:27 - mon >[Re:5] さいぼーさんは書きました : > ただ、孔が小さいと水分もなかなか下に抜くのが大変そうですね。 大きいと細胞が抜けますから...。0.45uｍでもdot blotの時のように下にティッシュを置いておくと疎水性膜でも吸い込みますよ（ただし事前に膜の浸水処理は必要）。 免染だと液量が多いから吸収シートが良いかな？？

(無題) 削除/引用 No.2982-7 - 2014/04/20 (日) 00:32:18 - さいぼー >Lさん 目的の細胞が一種類のみではないので、その方法ですと全細胞を対象にできているか不明ですので用いれないのです。 また、免染後にフローサイトへの応用も考えているので接着させられないのです。 しかし、他の機会に応用させていただきます。 ありがとうございました！

(無題) 削除/引用 No.2982-6 - 2014/04/20 (日) 00:11:20 - L 浮遊細胞を遠心せずに免疫染色したいという事であれば、固定前にスライドグラスかカバースリップにのせてしまうという手もありますね。例えば、 （１）生きている細胞を培地にいれたままコニカルチューブ内で１時間程培養すると、ほとんどの細胞が沈みますので、そこで上清を除去し、残った少量の培地にサスペンドして、スライドグラスにスメアを引いてから固定する。 （２）生きている細胞を少量の培地にサスペンドして、スライドグラス上のパップペンで囲んだエリア（あるいはカバースリップ）に数滴落として、１時間程培養。その後、丁寧に上清を除去して、固定。 （１）の方法は、普段私が使っている方法です。難点はスメアとその後の風乾の過程で形態が影響を受ける可能性を否定できない事ですが、臨床の現場で造血細胞の形態評価をする場合もスメアと風乾により作成されたスライドグラスを使っているので、許容範囲と考えています。 （２）の方法は、隣のラボの人たちが使っている方法なのですが、私がやると細胞のロスがかなりある（１時間の培養ではスライドグラスにつかない細胞がかなりある）ので、この方法はあまり使ってません。スライドグラスをコートすれば、改善する可能性もありますが。 ご参考まで。

(無題) 削除/引用 No.2982-5 - 2014/04/19 (土) 17:28:54 - さいぼー >monさん ありがとうございます！この手のものを探していました。 ただ、孔が小さいと水分もなかなか下に抜くのが大変そうですね。 サンプルをもらって試してみたいと思います。

(無題) 削除/引用 No.2982-4 - 2014/04/19 (土) 17:26:51 - さいぼー >みさん 浮遊細胞を遠心せずに そのまま免染できたらいいなー と思っているので、長時間静置はあまりしたくないのです。 ありがとうございます。

Transwell？ 削除/引用 No.2982-3 - 2014/04/19 (土) 06:41:34 - mon もしかして、Transwellみたいなものをお探しかな？ 材質・口径はいくつかあるようなので、適切なものを選んでください。 http://catalog2.corning.com/LifeSciences/en-JP/Shopping/Product.aspx?categoryname=Cell+Culture+and+Bioprocess(Lifesciences)%7c24+Well+Transwell+Permeable+Supports(Lifesciences)%7cPolyester+Membrane+24+Well+Transwell+Permeable+Supports+(Lifesciences)#

(無題) 削除/引用 No.2982-2 - 2014/04/19 (土) 01:13:27 - み 遠沈管の中でしばらく置いておけば沈むだろう

浮遊細胞の液交換 削除/引用 No.2982-1 - 2014/04/18 (金) 01:18:10 - さいぼー いつも参考にさせていただいております。 固定した浮遊細胞を、遠心せず液交換を行いたいのですが 18wellなどにハマる、フィルターなどは販売しているのでしょうか？ 探し方が悪いのか、都合の良い品がみつかりません。 液交換後の細胞は、また使用いたします。

全9件 ( 1 〜 9 )　 前 | 次 　1/ 1. /1

パスワードを入力してチェックした記事を

チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する 名前  メール  　アドレス非公開    タイトル  本文       設定  クッキーを保存（次回の入力の手間を省けます） 上に上げない（トピックの一覧で一番上に移動させません） 解決（問題が解決した際にチェックしてください） 暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。 送信

---

〔使い方〕 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。

---