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同じハイブリドーマからのモノクローナル抗体について
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No.2958-TOPIC - 2014/04/11 (金) 03:02:16 -
けん
いつもお世話になっております。
早速質問なのですが、同じハイブリドーマを使って違う抗体メーカーからモノクローナル抗体を販売しているケースがよくあると思います。この場合、抗体の濃度や取得方法は違うかもしれませんが、ほとんど同じactivityを持つと考えて良いものでしょうか?例えば片方のメーカーのを使ってwesternでバンドを検出できたならば、もう片方でもまず間違いなく同じ結果を得られるかといったことです。
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No.2958-10 - 2014/04/14 (月) 22:40:53 -
けん
名無しさん、中年さん
返信ありがとうございます。総合的に考えると、性質はほとんど同じと考えても良さそうですね!
(無題)
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No.2958-9 - 2014/04/14 (月) 13:36:38 - 中年
汎用される抗体ならば各メーカーが自前で精製している場合が多いのだと思いますが、それほどでもないものは実は全く同じ製品(同じロット)のものを複数のメーカーでラベルだけ変えて売っている場合も結構あります。その場合でもメーカー毎の品質管理などで性能に差が出ることはあり得ますが。
(無題)
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No.2958-8 - 2014/04/12 (土) 17:33:37 - 名無し
抗体そのものは蛋白質としては同じものなので、抗原特異性とか各種実験への適応の可否については同とおもう。ただ、精製の方法や、時期、保存法と保存期間、添加物等、ユーザーの手元にとどくまでの過程はメーカーごとに異なるし、途中で予期せぬアクシデント(搬送中の凍結融解とか)で失活したりとかもありうるし、メーカー間で活性に差異があってもそれ自体は十分起こりえることとおもう。ただ抗体は生物活性を有する蛋白質としてはけっこうタフな方なので、どのくらいの確率で起こるかということなら、経験的にはけっして高くはないとおもうけど。
(無題)
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No.2958-7 - 2014/04/12 (土) 07:15:37 -
けん
proteinさん
経験に基づく貴重なご意見ありがとうございます。
どなたかChIPでの経験がおありの方はいらっしゃらないでしょうか?
(無題)
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No.2958-6 - 2014/04/12 (土) 03:51:18 - protein
FACSの抗体での経験では、大手(BD, Biolegend, eBioscienceなど)から入手した場合、同じクローンであればほぼ同じシグナルの強さでした。ただ、PE-Cy5などのタンデム色素はある会社のがより良いということも経験しました。
(無題)
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No.2958-5 - 2014/04/11 (金) 23:15:45 -
けん
mbbさん
返信ありがとうございます。
そうですね、標識をつけてしまうと抗体の構造が変化して別ものになってしまうことも考慮しなければいけませんね。
(無題)
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No.2958-4 - 2014/04/11 (金) 12:23:40 - mbb
標識のついた一次抗体の場合、標識を導入する条件によって
活性が変化することがあるかもしれません。
(無題)
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No.2958-3 - 2014/04/11 (金) 03:17:41 -
けん
ぺーぺーさん
返信ありがとうございます。
モノクローナル抗体といえどもメーカーによって機能したりしなかったりするのですね。あるタンパク質に対してワークする抗体を探す時はその可能性も考慮した方が良いですね。
(無題)
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No.2958-2 - 2014/04/11 (金) 03:12:57 - ぺーぺー
経験に基いて恐縮ですが、昔他の研究室のページでFACSのプロトコールを確認していたら、2社か3社の抗体を試したけど1社しか動かなかったという事を書いていました。この場合、精製方法の違いだと思いますが。
同じハイブリドーマからのモノクローナル抗体について
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No.2958-1 - 2014/04/11 (金) 03:02:16 -
けん
いつもお世話になっております。
早速質問なのですが、同じハイブリドーマを使って違う抗体メーカーからモノクローナル抗体を販売しているケースがよくあると思います。この場合、抗体の濃度や取得方法は違うかもしれませんが、ほとんど同じactivityを持つと考えて良いものでしょうか?例えば片方のメーカーのを使ってwesternでバンドを検出できたならば、もう片方でもまず間違いなく同じ結果を得られるかといったことです。
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