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(無題) 削除/引用 No.2856-4 - 2014/02/27 (木) 16:16:48 - おお みなさんありがとうございました。 >[Re:3] 中西部ポスドクさんは書きました : > 以前膵臓beta細胞株をglucose freeで飼ったことがありますが、24時間ではほぼ変化がないものの48時間で大量死が起こり、そのまま死滅しました。確かピルビン酸を加えた培地だったと思います。 ありがとうございました。私もそんな感じでした。細胞にとってはかなりストレスなんでしょうか、、、ERストレスになるのは、糖修飾系がrepressされるからでしょうかねぇ。。。イノシトールをかわりにくわえているやつがあったなぁ。。。 >[Re:2] qqさんは書きました : > Glc-depletion培地で培養したことはないですが、Gal-DMEMで上手く飼えなかった経験があります。（飼えなかったのだから経験ではないな。） Galに変えただけでもだめなことはあるのですね。Leibovitzとか、CO2でpHをあわせずに使うような培地はGalつかっているのもありますよね。。。Galで維持できないことがあるなら、、、要注意ですねぇ。。。 Gal代謝経路みとかなくっちゃ。 > HEKの培地は、low-Glcですか、high-Glcでしょうか？ > high-Glcであれば、一度、low-Glcで順化したあとでやると良いのかもしれません。 highのほうなので、たしかにadaptationの時はだんかいてきにさげるのはいい案ですね。

glucose free medium 削除/引用 No.2856-3 - 2014/02/27 (木) 10:13:09 - 中西部ポスドク 以前膵臓beta細胞株をglucose freeで飼ったことがありますが、24時間ではほぼ変化がないものの48時間で大量死が起こり、そのまま死滅しました。確かピルビン酸を加えた培地だったと思います。 小胞体ストレスマーカーであるGRP78/BiPとGRP94はグルコース枯渇で上昇する蛋白として同定されていますので、おそらくは強い小胞体ストレスの為に細胞死が起こっていると思われます。実際小胞体ストレスマーカーの強い上昇が見られました。

(無題) 削除/引用 No.2856-2 - 2014/02/27 (木) 08:31:37 - qq Glc-depletion培地で培養したことはないですが、Gal-DMEMで上手く飼えなかった経験があります。（飼えなかったのだから経験ではないな。） HEKの培地は、low-Glcですか、high-Glcでしょうか？ high-Glcであれば、一度、low-Glcで順化したあとでやると良いのかもしれません。

glucose free DMEM 削除/引用 No.2856-1 - 2014/02/27 (木) 04:57:10 - おお glucose free DMEMなどのグルコースのない培地でまんまるの細胞を飼ったご経験のあるかたいらっしゃいますか。 ATP供給という面からいえば、glucoseを除いたとき、ピルビン酸をくわえればいいとおもわれますが、HEKなどではどうも維持できないです。 癌の性質を見るのにglucose freeの培地を使うというのをちらほらきくのですが、adaptationしているものもあるようですし、 glucose freeの培地をつかった実験をセットアップした経験のある方のご意見をききたいかと思います。

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