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トリプシンの細胞ダメージとは? トピック削除
No.281-TOPIC - 2012/03/12 (月) 17:45:10 - トリプシン
トリプシン、パパインとかいくつか細胞をシャーレから剥離する酵素があると思いますが、なるべく低侵襲で回収したいと思っています
この際、どうやって、低ダメージで回収できたと判定すればよろしいのでしょうか?
やはり、各酵素で細胞を回収して、それを再播種して、増加数を見るのが一番でしょうか?
それもありかと思いますが、それプラス、細胞が傷ついたかどうか判定したいのですが、何かいい方法とかありますでしょうか?
 
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ありがとうございます 解決済み 削除/引用
No.281-3 - 2012/03/12 (月) 18:09:15 - トリプシン
早速のご返答ありがとうございます
私の知らない知識があり、とても勉強になりました

別にどんな手法もOKでして、細胞をダメージなく回収したいと思っていました。(要は生きのいい細胞をほしい)
たしかにご返答いただいた内容のとおりです
ありがとうございました

(無題) 削除/引用
No.281-2 - 2012/03/12 (月) 18:00:39 - ~
候補にAccutaseが挙げられていないということは、酵素単品であることが前提条件なのでしょうか?

まずは、貴方の考えている"傷ついた"を具体的に定義しては?
例えば、細胞膜に穴が開くのであれば、その穴を通って細胞質から放出されたLDHの活性を測定してはいかがでしょうか。
何らかのタンパク質の分解であれば、分解産物を定量してはいかがでしょうか。

また、低ダメージを気にしているということは、細胞を回収した後の操作は、ダメージの影響を受けることが前提ですよね。
その操作で評価した方が、異なる評価系の結果を外挿するよりも説得力があるでしょう。

トリプシンの細胞ダメージとは? 削除/引用
No.281-1 - 2012/03/12 (月) 17:45:10 - トリプシン
トリプシン、パパインとかいくつか細胞をシャーレから剥離する酵素があると思いますが、なるべく低侵襲で回収したいと思っています
この際、どうやって、低ダメージで回収できたと判定すればよろしいのでしょうか?
やはり、各酵素で細胞を回収して、それを再播種して、増加数を見るのが一番でしょうか?
それもありかと思いますが、それプラス、細胞が傷ついたかどうか判定したいのですが、何かいい方法とかありますでしょうか?

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