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(無題) 削除/引用 No.2750-6 - 2014/01/21 (火) 21:56:04 - 名無し ウェル空けっぱなしじゃなくて、サンプルバッファーを適量アプ来したほうがいい。となりに何も流れてないと横方向に広がり気味になるので。

(無題) 削除/引用 No.2750-5 - 2014/01/21 (火) 14:41:50 - おお ありがとうございました。同一ゲルでだいじょうぶそうですね。抗体を流すのはたしかに案ですが、、、WBで抗体のレーンが間に入ってたりってちょっとpublicationにどうだろ。。。それにバンドのつよさのコントロールが、、、、でもコンディション確認には使えそうですね。考えてみます。

(無題) 削除/引用 No.2750-4 - 2014/01/21 (火) 11:03:25 - み 僕も１レーン空けて問題なかった記憶あり。 隣り合わせは駄目でした。 勿論、Loadするvolumeやコームの太さにもよるかもですが。 抗体を流してintact, heavy chain, Light chainの出方で条件検討可能です。

(無題) 削除/引用 No.2750-3 - 2014/01/21 (火) 10:41:16 - おお ありがとうございました。同一げるでやっている方がいらっしゃるということで、方針がきめやすくなりました。

(無題) 削除/引用 No.2750-2 - 2014/01/21 (火) 10:23:26 - yyy 経験上、濃度にもよるかも知れませんが、隣合わせると影響が出る可能性が高いと思います。 普通は還元サンプル側半分ですが、還元剤の濃度が高ければそれ以上に及ぶかも知れません。ということで、自分の場合は最低1レーンは空けるようにしています。マーカーにも還元剤が入ってるので、非還元サンプルを流す場合は、マーカーとの間も1レーン空けるようにしてます。

非還元状態でのSDSPAGE 削除/引用 No.2750-1 - 2014/01/21 (火) 09:48:34 - おお 非還元状態でのSDSPAGEですが、例えば還元状態(つまりDTTとか2-meをいれた)サンプルと同じゲルで流すと、隣のレーンとかどの程度影響うけるかなぁとおもいました。ご経験のある方いましたらお教え願えないでしょうか。なんレーンはなせばいいとか、全体にいくらかは影響が出るとか、、、、 還元用、非還元用と違うゲルで流す手もあるのですが、そうしても、マーカーにある還元剤をどうするかということになりますので、、、 あるいはDTTや2-meの還元力を中和できてSDSPAGE自体に影響受けないような酸化剤とかありますかねぇ。。。

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