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(無題) 削除/引用 No.267-3 - 2012/03/08 (木) 12:56:54 - も 低コピープラスミドベクターは試されましたか？ Ｆ因子やｐＳＣ１０１由来のベクターを探してみては？

(無題) 削除/引用 No.267-2 - 2012/03/08 (木) 12:51:55 - Harmonia 破壊株を作るときは、抗生物質遺伝子を入れたい場所の遺伝子配列ではさんだプラスミドを使いますね。 http://www.shigen.nig.ac.jp/ecoli/strain/nbrp/explanation/keioCollection.jsp

大腸菌染色体への遺伝子挿入方法 削除/引用 No.267-1 - 2012/03/08 (木) 10:44:22 - REC99 大腸菌でのタンパク質発現を行なっていますが、発現ベクターが不安定なため、発現ユニット（Promoter + 構造遺伝子）を大腸菌染色体に組み込みたいと考えています。 発現ユニットDNA断片の両側に、染色体上ターゲット部分の相同配列を付加するようにPCRし、このPCR産物でrecAでない株を形質転換しようと考えていますが、このような方法でよいのでしょうか？ もっと良い方法はあるか？この目的のためのキットや、受託サービスなどはあるか？なども含め、ご意見いただけるとうれしいです。

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