Bio Technical フォーラム

  • バイオ関連の実験をする上での、試薬、機器、プロトコールなどの情報交換の場です。
  • 新しいテーマで話を始める場合、質問をする場合は「新しいトピックを作る」から書き込みをしてください。
  • 質問に対して解答できる方は是非、書き込んで下さい。
  • このフォーラムにふさわしくないと管理人が判断した投稿は予告なく削除します。

新しいトピックを作る | トピック一覧 | 研究留学ネットに戻る

ひとつ前のフォーラム(readのみ)

このスレッドをはてなブックマークに追加このスレッドをはてなブックマークに追加

細胞内染色後のmRNA抽出 トピック削除
No.2606-TOPIC - 2013/11/28 (木) 21:50:45 - いし
よろしくおねがいします。
酵素AやサイトカインBを細胞内染色し、AおよびB陽性細胞をFACSでソートした後、これらの細胞のmRNAを抽出してマイクロアレイにかけることは可能でしょうか?

あるいは
細胞内染色をすると細胞膜だけでなく、核膜も穴があいてmRNAは消失するのでしょうか?
 
- このトピックにメッセージを投稿する -



5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


(無題) 削除/引用
No.2606-5 - 2013/12/18 (水) 09:14:08 - おお
固定してならやれないこともないが、分解などのバイアスを最小限に押さえるようなほうほう(確かそう言ったキットがある)をかまさないと、という気はします。かましたとしても信頼できるデーターになるかわかりません。

(無題) 削除/引用
No.2606-4 - 2013/12/18 (水) 04:43:38 - ぴf
できますよ。

(無題) 削除/引用
No.2606-3 - 2013/12/18 (水) 03:35:34 - protein
技術的なハードルはあるにはありますが、不可能ではないでしょう。
マイクロダイセクションのサンプルもマイクロアレイできますし。
permeablizedする前にFixするでしょうから、mRNAが流出するということはないでしょう。

ただ現実的には、サイトカインであれば
miltenyiとかから出ているcytokine capture assayを使うのかなとは思いまs。
https://www.miltenyibiotec.com/en/products-and-services/macs-cell-separation/cell-separation-reagents/cytokine-producing-cells.aspx

(無題) 削除/引用
No.2606-2 - 2013/11/29 (金) 02:33:59 - 直輝
細胞内染色のためにpermiabilizedすれば、当然核膜にも穴があくのでmRNA抽出は無理ですよ。

細胞外のマーカーで染色するか、サイトカインであればBispecific抗体を使わないと無理でしょうね(手に入ればの話だけど)。

細胞内染色後のmRNA抽出 削除/引用
No.2606-1 - 2013/11/28 (木) 21:50:45 - いし
よろしくおねがいします。
酵素AやサイトカインBを細胞内染色し、AおよびB陽性細胞をFACSでソートした後、これらの細胞のmRNAを抽出してマイクロアレイにかけることは可能でしょうか?

あるいは
細胞内染色をすると細胞膜だけでなく、核膜も穴があいてmRNAは消失するのでしょうか?

5件 ( 1 〜 5 )  前 | 次  1/ 1. /1


パスワードを入力してチェックした記事を チェックした記事を

このトピックにメッセージを投稿する
名前 
メール   アドレス非公開
   タイトル 
本文      
設定  クッキーを保存(次回の入力の手間を省けます)
上に上げない(トピックの一覧で一番上に移動させません)
解決(問題が解決した際にチェックしてください)
暗証  半角英数字8-12文字の暗証番号を入れると、あとで削除、修正ができます。
送信 

〔使い方〕
  • 「アドレス非公開」をチェックすれば、自分のメールアドレスを公開しないで他の方からメールを受け取れます。
  • 問題が解決した際には、解決ボタンをチェックして解決した旨のコメントをつけてください。これは、初めにトピックを作った人と管理人のみが可能です。
  • 半角カタカナ、機種依存文字(全角ローマ数字、○の中の数字等)は文字化けの原因となりますので使わないでください。