いつもお世話になっております。
当方、BigDyeterminater cycle sequencing kit v3.1を用いてダイレクトシークエンスを行っております。PCRpruductの精製はQUIAGEN、ダイターミネーターの除去はFastGene社の除去キット、シーケンサーはABIの3130xlです。
BigDyeを付けたsampleを2.2%SDS heating処理をせずに今まで何の問題もなくデータが得られていました。ある方から「SDSでのheating処理をしないなんてどうかしてる。」とのご指摘を受けました。
SDS処理はデータの精度に大きく関わるのでしょうか?
皆様のご意見をお聞かせ下さい。
よろしくお願い致します。 |
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