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(無題) 削除/引用 No.2299-3 - 2013/08/16 (金) 05:20:12 - Redsox 「おお」さんとほぼ同意見です。 プログラムされたネクローシス（Necroptosis）を評価なさりたいということでしょうか？ ApoptosisにはTUNELやCleaved caspase-3などのマーカーがありますが、私の知る限りでは確立したNecroptosisのマーカーは現在のところないと思います。 組織切片でNecroptosisを染色で証明するのは難しく、RIPK3などがもしコントロールと比べて発現が非常につよければNecroptosisが関与しているかもしれないと言える程度でしょうか。 更に電子顕微鏡で形態観察ができれば、ものが言えるかもしれません。 LIVE/DEADのキット単独に関しては、アポトーシスとネクローシスの評価はできないと思います。 生細胞と死細胞をFACSで定量するキットですので、インヒビターと組み合わせてみたらいかがでしょう？ Necrostatin1, NecroXなどのNecroptosisのインヒビターで細胞死を抑制できればNecroptosisの可能性を示唆することができると思います。 さらにCaspase-8を念頭においてZ-VADを組み合わせれば、いろいろ考察できると思います。 あとはRIPK1,3をKOした実験でしょうか。 がんばってください！

(無題) 削除/引用 No.2299-2 - 2013/08/15 (木) 23:36:56 - おお お示しの試薬は膜透過性などで染め分けるものなので無理なのでは? ネクローシスとかの定義にもよるけど、核の凝縮があるかを直接みるとか、それにかかわる蛋白を染めるとかカスペースが活性化しているかどうかをみるとか、そういったたぐいの染色が必要じゃないでしょうか。

組織でアポトーシスとネクローシスを染め分けたい 削除/引用 No.2299-1 - 2013/08/15 (木) 18:34:19 - megumi 大学院生のmegumiと申します。 いつも勉強させていただいております。 現在細胞死の研究をしており、細胞と組織両方でＴＵＮＥＬを用いてアポトーシスを検出しています。 今回アポトーシスだけでなくネクローシスも観察したいと考え、アポトーシスとネクローシスを染め分けたいと思っています。 in vitroではLIVE/DEADアッセイなどでカルセインとエチジウムホモダイマーでアポトーシスとネクローシスを染め分けられるようなのですが、組織切片ではどうでしょうか？ ご存知の方がいらっしゃいましたらご教示ください。 よろしくお願いします。

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