ヒトの細胞で発現する為のプラスミド発現ベクターについて質問です。
1. 発現に必要な要素は、"Promoter+ Kozak+ Gene (ATG....TGA)+ PolyA"で良いでしょうか?
2. BGH polyAをpcDNA3.1 (Invitrogen, Cat. V79020)からクローニングしようと思っております。pcDNA3.1のmap上には、1028-1252bpがBGH polyAと記載されています(BGH polyA 配列: CTGTGCCTTCTAGTTGCCAGC.........CTATGG)。そこでストップコドン (TGA)の直下にBGH polyAを挿入しようと思っています (TGACTGTGCCTTCTAGTTGCCAGC)。ストップコドン (TGA)とBGH polyAの間に余分な配列を入れなくても問題はないのでしょうか? |
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