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御礼 削除/引用 No.2137-7 - 2013/06/27 (木) 20:49:05 - 御礼 みなさん ありがとうございました

(無題) 削除/引用 No.2137-6 - 2013/06/27 (木) 03:05:02 - おお 蛍光色素は過剰に入った状態にすると考えるといいかと。

(無題) 削除/引用 No.2137-5 - 2013/06/27 (木) 03:03:41 - おお 蛍光色素は一定量いれて、サンプルのDNAによる蛍光強度を検量せんと照らし合せて定量するのが通常のやり方と思います。へきすとやDAPIではそういうプロトコールがあります。 たとえばゲルの中でも定量できますが、そのばあいげるのなかの色素の濃度はどのレーンも一緒ですよね。溶液でも同じように出来るはず。

(無題) 削除/引用 No.2137-4 - 2013/06/26 (水) 23:31:17 - AP EtBrのworking conc.は、たしか0.5 ug/mLだったと記憶します。 その程度でいいのでは。 検量線のためだけではなく、EtBr濃度一定でサンプルの方も希釈列にするのが定石だと思います。それで、適当な染色強度の希釈率の Molecular Cloningに、saran wrap methodというEtBrでDNA定量する方法が出ていたはずなので、参考にしてみては。 ↑ ネットに落ちてた http://www.csus.edu/indiv/r/rogersa/Quant4.pdf

補足 削除/引用 No.2137-2 - 2013/06/26 (水) 23:04:56 - DNA定量男 補足です ＤＮＡはゲル中ではなく、溶液中です

濃度未知のＤＮＡにどの程度のインターカレータを加えるべきか 削除/引用 No.2137-1 - 2013/06/26 (水) 23:03:28 - DNA定量男 すいません、論文等を読んでいて疑問に思いました ＤＮＡの定量を行っております。この際、ＹＯＹＯ−１やエチブロなどで濃度未知のＤＮＡを検量線から定量しようとしているのですが 濃度未知ですので、どの濃度でどの程度インターカレータ剤を加えるべきかという疑問につきあたりました いったい、どの濃度でどの程度加えるかということに関して ご意見おもちでしたら、ご教授いただければ幸いです よろしくお願いします

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