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ヒト正常線維芽細胞の重層化 トピック削除
No.2132-TOPIC - 2013/06/25 (火) 21:42:24 - 大きな木
in vitro で皮膚モデルを構築する実験を行なっており
線維芽細胞層の上にケラチノサイトを播種しております。
論文では,線維芽細胞数層の上のケラチノサイトを播種するとありますが,
線維芽細胞は重層化できるものなのでしょうか?

ご教示頂けますようお願い申し上げます。
 
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No.2132-8 - 2013/06/28 (金) 16:26:08 - おお
正常ファイブロブラスト、あるいは不死かファイブロブラストは単層でふえて一杯になるとコンタクトインヒビッションがかかって増えなくなってしまいます。

癌化した細胞はコンタクトインヒビッションがかからず、じゅうそうした状態でもふえます。
単層でまいた細胞の上にまいたらどうかといわれればよくわかりませんが、単層のじょうたいでまだ細胞が入り込む余地があればそこに入り込むでしょうし、、、

(無題) 削除/引用
No.2132-7 - 2013/06/28 (金) 09:16:56 - ~
いわゆるディッシュ底面が見えなくなるコンフルエントの状態から、2~3倍くらいまでは増えますね。
それを2~3層と呼んでいいかは疑問ですが。

繊維芽細胞は密に増えるとシート状にはがれやすくなりますが、
腕次第で何とかなるかもしれません。

多めに撒いたことはありませんが、ディッシュに接しない細胞がすぐに死ぬということはないと思います。


ただ、論文と同じ条件にしたいのであれば、その論文か、その論文が引用している論文に書かれているmethodを確認するのが早いのではないでしょうか。
コラーゲンゲル中に細胞がいる状態が、期待する状態なのかは外野にはわかりませんし。

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No.2132-6 - 2013/06/28 (金) 08:18:35 - 大きな木
単純に多く蒔いても重層しないという理解で宜しいのでしょうか。
多く蒔き過ぎた細胞は培地交換のときなどに剥がれてしまうということでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.2132-5 - 2013/06/28 (金) 02:49:21 - おお
ん?ファイブロブラスト自身を何そうか重ねることができるかという質問じゃなかったのね。

(無題) 削除/引用
No.2132-4 - 2013/06/28 (金) 01:12:11 - dec

できるかできないかで言えば、できます。
すでに重層化したものもJ-TECが売っています。
http://www.jpte.co.jp/business/LabCyte/EPI_MODEL.html

自分で重層化させたいなら、まだ試してませんがこんなキットもあります。
http://www.sumibe.co.jp/product/s-bio/cell-culture/cellfeuille/index.html

(無題) 削除/引用
No.2132-3 - 2013/06/27 (木) 07:18:44 - おお
コラーゲンとか使ってそのなかにファイブロを散らしたりするんじゃなかったかなぁ。。。となんとなく思い出したようなきがしている.

(無題) 削除/引用
No.2132-2 - 2013/06/27 (木) 02:57:09 - おお
通常の培養の条件下では単そうでしか増えませんね。。。

ヒト正常線維芽細胞の重層化 削除/引用
No.2132-1 - 2013/06/25 (火) 21:42:24 - 大きな木
in vitro で皮膚モデルを構築する実験を行なっており
線維芽細胞層の上にケラチノサイトを播種しております。
論文では,線維芽細胞数層の上のケラチノサイトを播種するとありますが,
線維芽細胞は重層化できるものなのでしょうか?

ご教示頂けますようお願い申し上げます。

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