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(無題) 削除/引用 No.184-6 - 2012/04/12 (木) 07:59:16 - acky 炭酸カルシウムを入れておくのが一般的で、 pH5.5よりも下がることはないと思います。 濃度は有機酸の産生度合によって変えたらいいです。 フィードは私も手動で行っています。 pHを維持したいのであればアンモニアなりNaOHなりも 手動でフィードすればいいと思います。 眠れないですけどね。 頑張ってください。

(無題) 削除/引用 No.184-5 - 2012/02/24 (金) 14:00:39 - ats どのような培地をお使いか不明ですが、tryptone,yeast extract richな培地に20mM MOPS(pH7)+消泡剤A204を添加して使用しています。

(無題) 削除/引用 No.184-4 - 2012/02/23 (木) 12:48:25 - ecoli 皆様ありがとうございます。 低温でじっくり培養する系ですので、5日を予定しています。 やはり手作業で行うしかなさそうですね。 グルコース濃度を測りつつ、バッファーを入れてみることにします。 回答してくださった皆様、ありがとうございました。

(無題) 削除/引用 No.184-3 - 2012/02/21 (火) 18:50:20 - ｔｔｔ ある程度培養して、pHが大きく変化する前に集菌、上清を捨てる〜新しい培地を入れるとするのが簡単です 培養スケールが大きいと難しいでしょうが

(無題) 削除/引用 No.184-2 - 2012/02/21 (火) 18:26:08 - ~ 大腸菌のフラスコ培養で、5時間(+O/N)ではなく5日ですか？ 灌流培養でもないと持たないのでは？ 増殖を抑えてタンパク質を作らせるような特殊な系なのでしょうか？ >培養途中に培地成分のフィードもする予定で、何か簡単な方法 サンプル数やかけられる金次第ですが、フラスコ1本ずつに手動で入れていくのが簡単です。 チューブをあらかじめ繋げたり、マニュピレーターを使ったりで、自動で入れてくれるようなシステムは、百万円単位になるかと。 動物細胞でですが、手動でアルカリを添加してpHをコントロールしてみたことはあります。 ただ、pHがどんどん変わっていくような条件だと、むりやりpHだけを調整しても、有機酸等の蓄積が止まらなかったので、調整しなくてもいい条件を選択するようにしました。

大腸菌の培地検討時のpH制御について 削除/引用 No.184-1 - 2012/02/21 (火) 17:36:40 - ecoli いつもお世話になっております。 通常はpH、DO制御可能な通気攪拌系で培養をしていますが、今回はフラスコ試験で培地成分の当たり試験を実施しようと考えています。培養菌株は大腸菌です。 フラスコで5日くらい培養する予定なのですが、その際の有機酸の生成でpH低下が生じ、生産物（タンパク）の生産が低調になることが予想されます。 皆様はフラスコ培養時の試験ではpHの制御はどのようにされていますか？バッファー濃度を上げて試験しましたが、pH低下が見られています。 また、培養途中に培地成分のフィードもする予定で、何か簡単な方法がありましたら、ご教授願います。 よろしくお願いします。

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