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(無題) 削除/引用 No.1664-4 - 2013/04/27 (土) 11:57:56 - 五目ラーメン 免疫染色に詳しいテクニシャンに聞いてみたところ、そういった手法はあるけど数か月単位で保存したい場合にやるだけで、1-2週間の保存でやる必要はない、とのことでした。 ご報告まで。

(無題) 削除/引用 No.1664-3 - 2013/04/24 (水) 20:44:28 - 五目ラーメン KYさん、コメントありがとうございます。 通常はこの後固定は必要ないということですね。 ものは試しで、機会があったら1回テストしてみます。

(無題) 削除/引用 No.1664-2 - 2013/04/22 (月) 20:57:00 - KY 後固定を必要とする蛍光免疫染色は聞いた事ないです。普通はなくても大丈夫です。 抗体がかなり弱いとか、何ヶ月もサンプル保存しないといけないとかの時に使うのですかね。

免疫蛍光染色での後固定 削除/引用 No.1664-1 - 2013/04/22 (月) 10:07:34 - 五目ラーメン いつも勉強させてもらっています。 培養細胞を用いて、細胞質内タンパクA、Bの2重免疫蛍光染色を行う予定です。 核蛋白の単染色の経験はあるものの、2重染色、細胞質内タンパクの染色は初めてです。 2重染色、特に細胞質内タンパクのプロトールをネットやテキストで手に入れて10ケほど、見比べています。 その内の1つで、2次抗体での染色後、formaldehydeで後固定をしているプロトコールに出くわしました。 http://www.ihcworld.com/_protocols/general_ICC/staining.htm ※3.7 のPost-Fixのところです。 他のプロトコールではこの「後固定」をしているものが見当たらなかったのですが、この後固定はかなり一般的にされているのでしょうか？それとも、上記のページのプロトコールが特殊なのでしょうか。 自分でやってみて比較すればいいのですが、後固定で蛍光が弱くなりやしないか心配で、また抗体等を節約したいもので、経験者の方のご意見をうかがいする次第です。 よろしくお願いします。

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