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(無題) 削除/引用 No.1635-3 - 2013/04/15 (月) 00:24:24 - 中年 高分子量側のバンドが下側にスメアするのは、やっぱりDNaseのコンタミでしょう。

(無題) 削除/引用 No.1635-2 - 2013/04/14 (日) 12:17:48 - AP 消化したあとの、泳動に持って行くまでの詳細を知りたいです。 ローディングダイを加えた泳動サンプルの濃度も100ng/μLくらいでしょうか。 それをどれくらいウェルにロードしたのでしょうか。 第一印象は、単純にオーバーロードじゃないかと、

λ/HindIII 削除/引用 No.1635-1 - 2013/04/13 (土) 20:53:17 - λ お世話になっています。 現在、自作でλ/HindIIIの作成を試みています。 最終濃度が100ng/μLとなるように溶液を調製してO/Nで消化を行なっています。 しかし、小さい分子量側はいいのですが、3kb以上の部分がスメアに近く なります。DNaseのコンタミやスター活性などは恐らくないと思いますが…。 65℃で保温後、急冷して泳動などもチェックしてみましたが特に変化は ありませんでした。何かコツなどあるのでしょうか？ みなさん、助言よろしくお願いします。

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