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(無題) 削除/引用 No.1522-4 - 2013/03/13 (水) 11:50:32 - plasmid安定発現株 皆様 ご回答いただきましてありがとうございました。 大変勉強になりました。 心よりお礼申し上げます。

(無題) 削除/引用 No.1522-3 - 2013/03/07 (木) 13:37:51 - おお >[Re:1] plasmid安定発現株さんは書きました : > プラスミドは環状ＤＮＡですよね。 > 染色体に取り込まれるには環状は何らかの要因でランダムに切断されて、染色体のランダムな場所に取り込まれるのでしょうか。 > > 不勉強で申し訳ありませんが、ご教授いただけたら幸いです。 染色体にはランダムに入るといえなくもないのですが、転写が盛んな場所に入りやすい傾向があるようです。

(無題) 削除/引用 No.1522-2 - 2013/03/07 (木) 13:08:37 - KY はい。プラスミドが細胞内でなんらかの原因により直鎖状になって、ゲノムには組み込まれると考えられています。 なので、直鎖にしてからトランスフェクションしたほうが安定発現株は作りやすいと考えられています。

プラスミドを細胞株に導入した場合の局在（環状は切断される？） 削除/引用 No.1522-1 - 2013/03/07 (木) 12:27:51 - plasmid安定発現株 よろしくお願いいたします。 ＧＦＰ発現のプラスミドをリポフェクタミン試薬で癌細胞株にトランスフェクションさせる実験を行っている学生です。 一過性発現ではなく、薬剤でセレクションを行い安定発現株を樹立することを目指しています。 安定発現株となるためには、プラスミドが運良く染色体内に取り込まれて細胞分裂の後も性質が受け継がれると理解しています。 このときのプラスミドの局在について質問があるのですが プラスミドは環状ＤＮＡですよね。 染色体に取り込まれるには環状は何らかの要因でランダムに切断されて、染色体のランダムな場所に取り込まれるのでしょうか。 不勉強で申し訳ありませんが、ご教授いただけたら幸いです。

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