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高等植物からの核DNA抽出
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No.145-TOPIC - 2012/02/10 (金) 15:59:28 -
りょう
高等植物から核DNAの抽出を行いたいと考えています。
通常では核DNAの他に葉緑体DNAやミトコンドリアDNAが混入することになると思います。
ここから核DNAを特異的に抽出するか、他のDNAを排除することのできるような抽出キットもしくは方法をご存じでしたらご教授願います。
どうぞよろしくお願いいたします。
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No.145-5 - 2012/02/15 (水) 11:52:38 -
りょう
皆様、返信どうもありがとうございます。
皆様の仰るよう、遠心で先に核を取り出す線ですすめてみようと思います。
(無題)
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No.145-4 - 2012/02/13 (月) 11:43:17 - ~
そのためのキットの特許は出ているようですが、売られてはいないようですね。
plant "nuclear DNA" extractなどでgoogle検索するとプロトコルが複数ヒットしますが、それらは参考になりませんか?
(無題)
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No.145-3 - 2012/02/11 (土) 10:05:51 -
Harmonia
昆虫組織から核タンパク抽出をしたけど、そのときもNo.145-2 もさんと同様。
組織をすりつぶし、ショ糖密度勾配(レイヤー)遠心で核を分離、その後、核膜を崩壊させて、タンパク質抽出。
核分離以降を核酸抽出にすればいいのかと。
参考として、オルガネラ抽出法を見れば?
それこそ葉緑体抽出の捨てている画分が欲しいものです。
(無題)
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No.145-2 - 2012/02/10 (金) 20:13:47 - も
条件をうまく設定して核が壊れないように組織を破砕し、適当な条件の密度勾配遠心で核だけを単離するのが一般的ですかね。「条件」は植物種・組織により異なります。キットは99%ないでしょう。
高等植物からの核DNA抽出
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No.145-1 - 2012/02/10 (金) 15:59:28 -
りょう
高等植物から核DNAの抽出を行いたいと考えています。
通常では核DNAの他に葉緑体DNAやミトコンドリアDNAが混入することになると思います。
ここから核DNAを特異的に抽出するか、他のDNAを排除することのできるような抽出キットもしくは方法をご存じでしたらご教授願います。
どうぞよろしくお願いいたします。
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