Bio Technical フォーラム

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スライド再固定 トピック削除
No.1330-TOPIC - 2013/01/12 (土) 13:02:45 - バドライト
凍結切片での免疫染色を行いましたが染まりません。対象はマウス胎児16日ほどで、4%PFA48時間で固定したのち凍結し、スライド作成しました。溶液にはTriton使用しています。先輩よりスライドを再固定する人もいるようだといわれました。その再固定の条件、時間を調べましたがたどりつけませんでした。どなたかご教示いただけませんでしょうか。
 
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No.1330-6 - 2013/01/21 (月) 00:46:02 - バドライト
ありがとうございます。さいどいろいろ振ってやってみます。

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No.1330-5 - 2013/01/13 (日) 14:44:38 - 2み
48時間は長すぎます。ファーストチョイスはオーバーナイト。
固定して凍結切片でもいけるかも。

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No.1330-4 - 2013/01/13 (日) 07:22:30 - バドライト
なるほど未固定でスライド作ってしまうのですね。ありがとうございます。

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No.1330-3 - 2013/01/12 (土) 21:54:02 - qうぇrちゅいおp@
未固定で凍結して、薄切りしてスライドにしてから、免疫染色時に15~30分くらいの短時間PFAで固定すればいけるんじゃね。(うちらは基本、未固定凍結切片でやってる。)これなら培養細胞の免疫染色と近い条件とおもうので、細胞でいけてるならいけるんじゃね。

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No.1330-2 - 2013/01/12 (土) 13:07:12 - バドライト
書き損ないましたが培養細胞ではよく染まるのです。

スライド再固定 削除/引用
No.1330-1 - 2013/01/12 (土) 13:02:45 - バドライト
凍結切片での免疫染色を行いましたが染まりません。対象はマウス胎児16日ほどで、4%PFA48時間で固定したのち凍結し、スライド作成しました。溶液にはTriton使用しています。先輩よりスライドを再固定する人もいるようだといわれました。その再固定の条件、時間を調べましたがたどりつけませんでした。どなたかご教示いただけませんでしょうか。

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