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TrypLE select 削除/引用 No.1326-2 - 2013/01/10 (木) 22:08:41 - DrCarter Trypsinは細胞表面マーカーを傷害するので、代わりにTrypLE selectを使用するよう教わり、今まで問題なくいっていました。Trypsinと同等以上の細胞剥離効果と、細胞をほとんど痛めないというのがTrypLEシリーズの特徴なので、理にかなっていると理解しています。剥がれにくい細胞（私の場合ケラチノサイト）の場合、10分以上置いても、細胞が痛んだ経験はありません。

FACSの際の細胞剥離につかうSolution 削除/引用 No.1326-1 - 2013/01/10 (木) 21:14:24 - FACS いつも本サイト見ながら研究させてもらってます。 非常に勉強になるので今回、非常に基本的なことですがクリティカルな内容について御教授頂けると幸いです。 細胞表面マーカー抗体でのFACS解析ではトリプシンは禁忌と習ったのですが、今使っている細胞は、10�pディッシュにコンフルエントの状態でPBS washしてからCell dissociation bufferをかけて37度インキュベーターに入れても、20-30分しても、細胞がシート状に剥がれず結局ピペッティングで強引にはがしたり、ディッシュをたたいて物理的に剥す、それでも細胞が凝集していてシングルセルへの効率が悪いという細胞株に悩まされています。 その場合でもtrypsinを使うのは絶対避けた方が良いでしょうか? それともPBS washの回数を増やしてみてからCell dissociation bufferの量を5ml位に増やす（今3ml/10�pディッシュくらいずつ使ってます）方が良いでしょうか？

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