いつもお世話になっております。
大腸菌で発現させたタンパク質を精製しようと思っています。
最終的な目的は抗体作製です。
大腸菌に発現させたところ、封入体で目的のタンパク質が確認されたため、8MUreaで可溶化させたのち、精製しました。その後のリフォールディングについてこれまでリン酸バッファーにUreaを溶かした溶液で段階的に透析を行っていました。
今回はより正確にリフォールディングしたいことや凝集を防ぎたいことから外液にDTTやアルギニンの添加を検討しているのですが、皆様はどのようなバッファーで透析されていますか。
差し支えなければアドバイスいただけますと幸いです。 |
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