Bio Technical フォーラム

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(無題) 削除/引用
No.13224-2 - 2026/03/04 (水) 22:34:25 - 774R
免疫の抗原として使いたいだけならリフォールディングとか気にする必要ありますかね?
SDS-PAGEのゲルからバンドを切り出して回収すれば十分じゃないかな?

封入体可溶化後のタンパク質のリフォールディング 削除/引用
No.13224-1 - 2026/03/04 (水) 18:52:07 - ころっけ
いつもお世話になっております。
大腸菌で発現させたタンパク質を精製しようと思っています。
最終的な目的は抗体作製です。

大腸菌に発現させたところ、封入体で目的のタンパク質が確認されたため、8MUreaで可溶化させたのち、精製しました。その後のリフォールディングについてこれまでリン酸バッファーにUreaを溶かした溶液で段階的に透析を行っていました。
今回はより正確にリフォールディングしたいことや凝集を防ぎたいことから外液にDTTやアルギニンの添加を検討しているのですが、皆様はどのようなバッファーで透析されていますか。


差し支えなければアドバイスいただけますと幸いです。

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