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ELISAでの抗体OD値測定について トピック削除
No.13217-TOPIC - 2026/02/17 (火) 13:27:04 - み
いつも参考にさせていただいております。
血清中の、あるタンパク質に対する抗体値を測定したく、96ウェルプレートにタンパク質をコーティングし、希釈した血清を加えてELISAの系を作成しました。

実際の抗体は入手できないため、スタンダードの抗体は置けない状態です。
実験の都合で、サンプルが100検体以上あり、一度に96ウェルで測定しきれない状況なのですが、プレートが複数枚にわたってしまう場合、OD値をどのように補正するのが望ましいか、詳しい方がもしいらっしゃいましたらご教示いただけませんでしょうか。
抗体OD値が高い血清で希釈系列を作成し、それをスタンダートとする、などは一般的なのでしょうか?
素人質問で申し訳ありませんが、よろしくお願い致します。
 
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ありがとうございます 削除/引用
No.13217-4 - 2026/02/17 (火) 15:34:46 - み
774R様、う様、コメント頂きありがとうございます。大変参考になりました。
強陽性の血清を複数混合して、スタンダードの希釈系列を作成してみたいと思います。時々OD値のみで結果を表示している論文もありますが、どうのなのでしょうね...少なくとも複数プレートに渡る場合は、そのまま比較は無理なのでスタンダードが必須なのかなと思いました。

(無題) 削除/引用
No.13217-3 - 2026/02/17 (火) 14:27:01 - う
強陽性血清(単体よりできれば強陽性2–5検体をプール)して、各プレートに希釈で数点載せて標準にするのがいいと思います。相対的なもので絶対値が出るわけではないので、これという決まりはないですけど。

(無題) 削除/引用
No.13217-2 - 2026/02/17 (火) 13:54:35 - 774R
OD値と抗体価はリニアに相関するわけではないので、1点の希釈率で求めても大体の傾向が分かるだけです。
より正確に抗体価を求めたい場合は、希釈系列を作製し、希釈率とOD値のシグモイド曲線のようなものをプロットし、あるODとなる希釈率を計算で求めることになるかと思います。その際、コントロールとなる何かを同じプレートで測定し、それとの相対値で表すことで複数のサンプルを数値化することが出来ます。
100検体もあったらやってられないと思いますが・・・

ELISAでの抗体OD値測定について 削除/引用
No.13217-1 - 2026/02/17 (火) 13:27:04 - み
いつも参考にさせていただいております。
血清中の、あるタンパク質に対する抗体値を測定したく、96ウェルプレートにタンパク質をコーティングし、希釈した血清を加えてELISAの系を作成しました。

実際の抗体は入手できないため、スタンダードの抗体は置けない状態です。
実験の都合で、サンプルが100検体以上あり、一度に96ウェルで測定しきれない状況なのですが、プレートが複数枚にわたってしまう場合、OD値をどのように補正するのが望ましいか、詳しい方がもしいらっしゃいましたらご教示いただけませんでしょうか。
抗体OD値が高い血清で希釈系列を作成し、それをスタンダートとする、などは一般的なのでしょうか?
素人質問で申し訳ありませんが、よろしくお願い致します。

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