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(無題) 削除/引用 No.13189-8 - 2025/12/24 (水) 12:57:17 - mp マクロファージ系はどのような方法で遺伝子導入するにせよ、さまざまなセンサーが働いて遺伝子発現等に多大な影響を与えるのは間違いないです。Rawにレンチを使ったことがありますが、性質が変わってしまって苦労しました。ネガコンをきちんと取れていれば問題ないとは思いますが。

(無題) 削除/引用 No.13189-7 - 2025/12/24 (水) 02:20:48 - eNOS トランスフェクション試薬を使ってトランジェントで入れると（いや実際には殆ど入らないけど）、iNOSの発現なんかが極度に上昇したりして、何を見るにしても影響が大き過ぎません？

(無題) 削除/引用 No.13189-6 - 2025/12/23 (火) 12:05:18 - PYK エレポかウイルスしかないような。。 siRNAですら導入するのが難しい印象。 以前、RNAiMAXでsiRNAを導入したことあるけど、2回くらいtransfectionしてやっと70%くらいまで落ちたな。

(無題) 削除/引用 No.13189-5 - 2025/12/23 (火) 10:01:20 - DEM お手軽なのは、エレクトロポレーション法

(無題) 削除/引用 No.13189-4 - 2025/12/22 (月) 23:30:03 - ゆ 使用するTF試薬もよるけど、RAW264の場合、これを併用することでTF効率は2~4倍は向上するらしい。 ttps://www.cosmobio.co.jp/product/detail/nate-transfection-enhancer-ing.asp?entry_id=45301 他にもTFが困難なマクロファージ系細胞などに使われた実績のあるTF用試薬はあるようです。

(無題) 削除/引用 No.13189-3 - 2025/12/22 (月) 10:58:09 - ゆ マクロファージ系は遺伝子導入が困難なので、みなさん条件を検討して色々工夫しているようでRAW263とtransfectionで調べると文献や方法が見つかると思いますが、そうしたものを調べて整理してお知らせしたほうがよろしいですか。

(無題) 削除/引用 No.13189-2 - 2025/12/22 (月) 07:53:05 - みなし マクロファージ系列は遺伝子導入は困難ですよね。 ウイルスでも。免疫系の細胞なので、外来性DNAは自然免疫反応を惹起して排除しようとするからです。

RAW 264細胞、遺伝子が入らない 削除/引用 No.13189-1 - 2025/12/21 (日) 14:16:49 - マクロファージ お世話になります。 RAW 264細胞に発現ベクターを導入する実験を行っています。 Lipofectamin 3000を使用して、GFP発現ベクターでまず条件検討を行っているのですが、遺伝子導入効率が10%程度しか入りません。 みなさん、どのような方法で入れているのでしょうか。 レンチウイルスを使えば安定発現株は取れるのですが、出来たらトランジェントで複数のベクターを実験したくアドバイスいただけましたら幸いです。

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