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roche blocking reagentの溶かしかたについて トピック削除
No.13185-TOPIC - 2025/12/17 (水) 20:27:39 - さぼ
お世話になっております。

rochのblocking reagentを使っている方に質問です。

取説にはマレイン酸バッファーに入れて60℃で加熱して溶かす(10%溶液)こと、そして、1時間あるいは完全に溶けるまで、とも書いてます。いつも1時間は撹拌してとかしてますが、溶け切ったことがありません。完全に溶かすまで、というのはどれくらいの時間がかかるものでしょうか?(たとえば、全量50mL作るとして)
もし、一晩でも問題ないのであれば、ファルコンチューブにでも入れて、ハイブリオーブン内でゆっくり溶かそうと思っています。毎回50mL作って分注して冷凍保存するので、オートクレーブして溶かすというのは考えていません。

よろしくお願いします。
 
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(無題) 削除/引用
No.13185-7 - 2025/12/23 (火) 11:39:56 - さぼ
>[Re:6] G25さんは書きました :
> >ちなみに、電子レンジでもよさそうなのですが、これで溶かしている方はいるのでしょうか?
>
> ではないのですが、Blocking Reagent 1本分、500 mLを1バッチで作るのをルーチンにしていますので、
> ・それだけの液体を収めて電子レンジにかけられるような容器はない。
> ・濃度が高く粘性もでるので、より突沸の危険性がある(アガロースゲルを溶かすどころじゃない)。
> ・溶け切るまで電子レンジをかけている間、突沸しないようにずっと張り付いて見てなきゃならない
> ですから、オートクレーブが最善の方法だと思います。
> 滅菌にもなるしね
>
>


回答ありがとうございます。
一度電子レンジで試してみましたが、確かに突沸して危険だったので、オートクレーブが一番ですね

(無題) 削除/引用
No.13185-6 - 2025/12/19 (金) 18:05:06 - G25
>ちなみに、電子レンジでもよさそうなのですが、これで溶かしている方はいるのでしょうか?

ではないのですが、Blocking Reagent 1本分、500 mLを1バッチで作るのをルーチンにしていますので、
・それだけの液体を収めて電子レンジにかけられるような容器はない。
・濃度が高く粘性もでるので、より突沸の危険性がある(アガロースゲルを溶かすどころじゃない)。
・溶け切るまで電子レンジをかけている間、突沸しないようにずっと張り付いて見てなきゃならない
ですから、オートクレーブが最善の方法だと思います。
滅菌にもなるしね

(無題) 削除/引用
No.13185-5 - 2025/12/19 (金) 13:05:10 - さぼ
>[Re:4] AAさんは書きました :
> 基本的にオートクレーブでマレイン酸に溶かし、分注して凍結しています。
> 考えていない、というコメントのなか恐縮ですが、、、

>[Re:3] G25さんは書きました :
> 500 mL(Blocking Reagent1ボトル分)まとめて溶かして、50 mL conical tube10本に分注してストックとしたらよさそうなものだが

>[Re:2] G25さんは書きました :
> オートクレーブかければ溶けます。
> 滅菌やDEPC処理後の未反DEPCの分解なんかを兼ねて

みなさん回答ありがとうございます。

あれこれ考えるよりは、オートクレーブしてしまったほうがよい、というのは本当にその通りだと思います。

ちなみに、電子レンジでもよさそうなのですが、これで溶かしている方はいるのでしょうか?

(無題) 削除/引用
No.13185-4 - 2025/12/18 (木) 21:49:52 - AA
基本的にオートクレーブでマレイン酸に溶かし、分注して凍結しています。
考えていない、というコメントのなか恐縮ですが、、、

(無題) 削除/引用
No.13185-3 - 2025/12/17 (水) 22:18:01 - G25
500 mL(Blocking Reagent1ボトル分)まとめて溶かして、50 mL conical tube10本に分注してストックとしたらよさそうなものだが

(無題) 削除/引用
No.13185-2 - 2025/12/17 (水) 22:10:20 - G25
オートクレーブかければ溶けます。
滅菌やDEPC処理後の未反DEPCの分解なんかを兼ねて

roche blocking reagentの溶かしかたについて 削除/引用
No.13185-1 - 2025/12/17 (水) 20:27:39 - さぼ
お世話になっております。

rochのblocking reagentを使っている方に質問です。

取説にはマレイン酸バッファーに入れて60℃で加熱して溶かす(10%溶液)こと、そして、1時間あるいは完全に溶けるまで、とも書いてます。いつも1時間は撹拌してとかしてますが、溶け切ったことがありません。完全に溶かすまで、というのはどれくらいの時間がかかるものでしょうか?(たとえば、全量50mL作るとして)
もし、一晩でも問題ないのであれば、ファルコンチューブにでも入れて、ハイブリオーブン内でゆっくり溶かそうと思っています。毎回50mL作って分注して冷凍保存するので、オートクレーブして溶かすというのは考えていません。

よろしくお願いします。

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