Bio Technical フォーラム

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アポトーシス検出方法(マウス組織) トピック削除
No.13174-TOPIC - 2025/12/02 (火) 12:17:48 - APO
いつも大変お世話になっております。

4% PFA固定化したマウス組織において、アポトーシスを検出したいと考えています。
以前はRocheのTUNELキットを使用していましたが、予算的に購入は厳しいです。

そこで抗体を用いて組織上で検出出来ないかと考えています。
Cleaved caspase-3やcleaved PARPなどが思い浮かべますが、皆様どのような抗体を使われておられるか情報をシェアしていただけないでしょうか。

ProteintechやBiolegendが安価な認識ですので、そこで購入できればと考えていますが、色々あり迷ってしまいました。

どうかお力いただけましたら幸甚です。
 
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(無題) 削除/引用
No.13174-4 - 2025/12/09 (火) 12:14:09 - aqwdefrg
自分の経験ではTUNNELはなんだかなあみたいな感じだったけど、Cleaved PARP抗体はいい感じで検出できました。

apoptosisは培養細胞系の実験の場合とは違い、組織では検出されにくいです。(人為的にチャレンジ加えてapoptosisを誘導とかしない場合、検出されるアポトーシス細胞数は病態モデルとかでも時間かけて探さないと見つからないくらいすごい少ないです。こういう細胞は生体内では周りの細胞とか自然免疫系の細胞により速やかに除去(貪食)されるからと思う。

そういうことから検出感度は重要と思うので検出は蛍光法ではなくて感度の高いDAB染色の方がいいと思います。

(無題) 削除/引用
No.13174-3 - 2025/12/03 (水) 17:51:22 - aqwdefrg
画像検索で論文のFigでいい感じのデータ画像(動物種や組織などの点で自分の検体に近いものが良い)が出てる抗体や、使用実績の多いものを選べば良いのではないでしょうか。モノクロならばクローン名も重要な情報になりますね。あと抗体は必ずしも高額なものが優れているというわけではありません。

(無題) 削除/引用
No.13174-2 - 2025/12/03 (水) 09:04:02 - おお
論文は検索してみましたでしょうか?これまで私はなるだけそうして質問に答えてきましたが、ちょっと時間的に厳しいので。

アポトーシス検出方法(マウス組織) 削除/引用
No.13174-1 - 2025/12/02 (火) 12:17:48 - APO
いつも大変お世話になっております。

4% PFA固定化したマウス組織において、アポトーシスを検出したいと考えています。
以前はRocheのTUNELキットを使用していましたが、予算的に購入は厳しいです。

そこで抗体を用いて組織上で検出出来ないかと考えています。
Cleaved caspase-3やcleaved PARPなどが思い浮かべますが、皆様どのような抗体を使われておられるか情報をシェアしていただけないでしょうか。

ProteintechやBiolegendが安価な認識ですので、そこで購入できればと考えていますが、色々あり迷ってしまいました。

どうかお力いただけましたら幸甚です。

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