お世話になります。
現在、細胞より抽出した中性脂質をMS解析しようと計画しています。
そこでDEAE-sephadex A-50を使い、結合しなかった画分をneutral lipidsとして回収したいです。
しかし、調べてみると意外にもanion IEXに結合しないリン脂質は割合多いようですね。
そこで、anion IEXのunbound fraction(neutral lipids contaminated with phospholipids)をsaponifyしようと計画しています。
リン脂質を除くために、saponification後、preparative TLCにより目的の脂質を削って精製を行いたいです。
そこで私の質問は、saponificationについてです。
初めて行うので色々調べていたら、NaOHで行う場合や、KOHを使う場合。
濃度や温度、処理時間もまちまちでした。
教授に伺うとsaponificationしすぎはよくないなどと忠告されました。
いい案配があるのか、コツや、難しい点、気を付けるべき点ありましたら、その辺りご教示いただけないでしょうか?
読みずらい文章で恐縮ですが、どうかよろしくお願いします。 |
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