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サポニン化について トピック削除
No.1312-TOPIC - 2013/01/07 (月) 21:13:09 - saponification
お世話になります。
現在、細胞より抽出した中性脂質をMS解析しようと計画しています。

そこでDEAE-sephadex A-50を使い、結合しなかった画分をneutral lipidsとして回収したいです。
しかし、調べてみると意外にもanion IEXに結合しないリン脂質は割合多いようですね。

そこで、anion IEXのunbound fraction(neutral lipids contaminated with phospholipids)をsaponifyしようと計画しています。

リン脂質を除くために、saponification後、preparative TLCにより目的の脂質を削って精製を行いたいです。

そこで私の質問は、saponificationについてです。
初めて行うので色々調べていたら、NaOHで行う場合や、KOHを使う場合。
濃度や温度、処理時間もまちまちでした。

教授に伺うとsaponificationしすぎはよくないなどと忠告されました。
いい案配があるのか、コツや、難しい点、気を付けるべき点ありましたら、その辺りご教示いただけないでしょうか?

読みずらい文章で恐縮ですが、どうかよろしくお願いします。
 
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サポニン化について 削除/引用
No.1312-1 - 2013/01/07 (月) 21:13:09 - saponification
お世話になります。
現在、細胞より抽出した中性脂質をMS解析しようと計画しています。

そこでDEAE-sephadex A-50を使い、結合しなかった画分をneutral lipidsとして回収したいです。
しかし、調べてみると意外にもanion IEXに結合しないリン脂質は割合多いようですね。

そこで、anion IEXのunbound fraction(neutral lipids contaminated with phospholipids)をsaponifyしようと計画しています。

リン脂質を除くために、saponification後、preparative TLCにより目的の脂質を削って精製を行いたいです。

そこで私の質問は、saponificationについてです。
初めて行うので色々調べていたら、NaOHで行う場合や、KOHを使う場合。
濃度や温度、処理時間もまちまちでした。

教授に伺うとsaponificationしすぎはよくないなどと忠告されました。
いい案配があるのか、コツや、難しい点、気を付けるべき点ありましたら、その辺りご教示いただけないでしょうか?

読みずらい文章で恐縮ですが、どうかよろしくお願いします。

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